KANEKA KanCapA(TM) 抗体纯化树脂
发布时间:2024-02-20 点击数:103
新标准 抗体纯化树脂
KANEKA KanCapA™
本产品为 Protein A 亲和层析树脂。用于从活体样本及细胞培养上清纯化免疫球蛋白及包含 Fc 段的重组抗体。
本产品由高交联纤维素微珠及新研发的耐碱 Protein A 配体构成,可用于 IgG 的亲和纯化。
◆特点
• 耐碱
• 良好洗脱条件
• 高抗体结合能力
• 可循环使用
• 便于扩增
◆关于改良 Protein A
KanCapA™ 采用的不是天然 Protein A,而是使用变异型C域5聚物的新型 Protein A。
天然 Protein A的C域结合于 Fc 段,也结合于 Fab 段,其中与VH3亚家族抗体的反应性较高。该类型的解离需要弱酸条件下洗脱。
为改善该问题,使用分子设计系统重新设计分子,研发了保持耐碱性、改善 Fab 段的非特异性结合及洗脱曲线的 Protein A。
本产品采用的 Protein A
1. C5 聚体蛋白质 | 良好pH条件下清晰地洗脱抗体 | |
2. 较高的耐碱性 | ||
3. 减少 Fab 段的非特异性结合 |
◆产品特性
KANEKA KanCapA™ 产品特性
矩阵 | 高交联纤维 | ※ 1) 平均粒度为累积体积分布的中间粒度 2) 5%动态结合容量为前端分析测定(停留时间3分钟) 3) 可在强碱条件下清洗,但请避免长时间的清洗 4) 请勿冷冻 |
平均粒度1) | 65-85 μm | |
配体 | Protein A,重组(抗强碱) | |
结合 | 化学结合(还原胺化) | |
动态结合容量2) | ≧35 mg 人多克隆 IgG/mL载体 | |
化学稳定性3) | 使用亲和层析通用可溶性溶媒时较稳定 | |
pH 范围3) | pH 2-13 | |
静止清洗条件3) | 0.1-0.5 mol/L氢氧化钠 6-8 mol/L尿素、6 mol/L盐酸胍 | |
流量 | 最大 500cm/h(层高:20-25 cm) | |
停留时间 | ≧3分钟(建议:4-6分钟) | |
保存条件4) | 20%乙醇浑浊液,1~10℃ |
◆应用
1、Fab段 纯化应用
• 利用 KANEKA KanCapA™ 的特点,可从经木瓜蛋白酶处理后的 IgG 溶液分馏 Fc 段及 Fab 段。
2、IgG 洗脱曲线(pH3.5 & pH3.0)
• 洗脱范围已优化,可清晰地分馏提纯。
3、通过强碱清洗进行树脂循环
• 进行 300 次循环处理后(0.1M 氢氧化钠溶液 15 分钟),IgG 的结合容量的减少率仍低于20%,表明其循环性能较高。
使用 0.1 M 氢氧化钠溶液进行循环处理后的 IgG 结合活性曲线数据 | 循环处理后(0.1 M 氢氧化钠溶液 15 分钟)的IgG回收率及 Protein A 配体的渗滤量的曲线数据 |
4、动态结合容量 曲线数据
• 在4-6分钟停留时间过程中,DBC 较高。
※ 动态结合容量表示纯化样本在流动的状态下,回收程度的数值。动态结合容量较高的载体的流速较快,可回收大量目标分子,因此可以认为在短时间内有效纯化目标分子的优质载体。
KANEKA KanCapA™的Dynamic Binding Capacity (DBC; 动态结合容量) 曲线数据
5、不同大小的树脂填充装柱的压力/流速绘图数据
填充依赖压力的计算方法是从整体压力减去系统压力。
6、KANEKA KanCapA™ 于各种大小的柱的填充效果
• KANEKA KanCapA™ 适用于各种大小的柱。
充填方法 | L. D.(cm) | 高度(mm) | 培养皿/m | 非对称性 |
流动填充 | 4.4 | 200 | 5710 | 1.14 |
轴向力填充 | 7 | 199 | 6063 | 1.06 |
流动填充 | 10 | 201 | 5276 | 1.18 |
流动填充 | 30 | 200 | 5208 | 1.17 |
轴向力填充 | 45 | 233 | 4712 | 1.09 |
以下是脉冲注入数据:
可溶性溶媒:1(v/v)% 丙酮
注入量:1% 柱容量
流速:60 cm/h
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
114-01071 | KANEKA KanCapA™ | 2mL (net 1mL) | for Genetic Research |
110-01073 | KANEKA KanCapA™ | 10mL (net 5mL) | for Genetic Research |
118-01074 | KANEKA KanCapA™ | 50mL (net 25mL) | for Genetic Research |