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KANEKA KanCapA(TM) 抗体纯化树脂

发布时间:2024-02-20 点击数:103
新品速递图wako.jpg新标准 抗体纯化树脂
KANEKA KanCapA
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本产品为 Protein A 亲和层析树脂。用于从活体样本及细胞培养上清纯化免疫球蛋白及包含 Fc 段的重组抗体。
本产品由高交联纤维素微珠及新研发的耐碱 Protein A 配体构成,可用于 IgG 的亲和纯化。
◆特点
• 耐碱
• 良好洗脱条件
• 高抗体结合能力
• 可循环使用
• 便于扩增
◆关于改良 Protein A
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KanCapA™ 采用的不是天然 Protein A,而是使用变异型C域5聚物的新型 Protein A。
天然 Protein A的C域结合于 Fc 段,也结合于 Fab 段,其中与VH3亚家族抗体的反应性较高。该类型的解离需要弱酸条件下洗脱。
为改善该问题,使用分子设计系统重新设计分子,研发了保持耐碱性、改善 Fab 段的非特异性结合及洗脱曲线的 Protein A。
本产品采用的 Protein A
1. C5 聚体蛋白质
搜狗截图20160727141313.png
良好pH条件下清晰地洗脱抗体
2. 较高的耐碱性
3. 减少 Fab 段的非特异性结合
◆产品特性
KANEKA KanCapA 产品特性
矩阵
高交联纤维
 ※
  1) 平均粒度为累积体积分布的中间粒度
  2) 5%动态结合容量为前端分析测定(停留时间3分钟)
  3) 可在强碱条件下清洗,但请避免长时间的清洗
  4) 请勿冷冻
平均粒度1)
65-85 μm
配体
Protein A,重组(抗强碱)
结合
化学结合(还原胺化)
动态结合容量2)
≧35 mg 人多克隆 IgG/mL载体
化学稳定性3)
使用亲和层析通用可溶性溶媒时较稳定
pH 范围3)
pH 2-13
静止清洗条件3)
0.1-0.5 mol/L氢氧化钠
6-8 mol/L尿素、6 mol/L盐酸胍
流量
最大 500cm/h(层高:20-25 cm)
停留时间
≧3分钟(建议:4-6分钟)
保存条件4)
20%乙醇浑浊液,1~10℃
◆应用
1、Fab段 纯化应用
• 利用 KANEKA KanCapA™ 的特点,可从经木瓜蛋白酶处理后的 IgG 溶液分馏 Fc 段及 Fab 段。
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2、IgG 洗脱曲线(pH3.5 & pH3.0)
• 洗脱范围已优化,可清晰地分馏提纯。
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3、通过强碱清洗进行树脂循环
• 进行 300 次循环处理后(0.1M 氢氧化钠溶液 15 分钟),IgG 的结合容量的减少率仍低于20%,表明其循环性能较高。
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使用 0.1 M 氢氧化钠溶液进行循环处理后的 IgG 结合活性曲线数据
循环处理后(0.1 M 氢氧化钠溶液 15 分钟)的IgG回收率及 Protein A 配体的渗滤量的曲线数据
4、动态结合容量 曲线数据
• 在4-6分钟停留时间过程中,DBC 较高。
※ 动态结合容量表示纯化样本在流动的状态下,回收程度的数值。动态结合容量较高的载体的流速较快,可回收大量目标分子,因此可以认为在短时间内有效纯化目标分子的优质载体。
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KANEKA KanCapA™的Dynamic Binding Capacity (DBC; 动态结合容量) 曲线数据
5、不同大小的树脂填充装柱的压力/流速绘图数据
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填充依赖压力的计算方法是从整体压力减去系统压力。
6、KANEKA KanCapA 于各种大小的柱的填充效果
• KANEKA KanCapA™ 适用于各种大小的柱。
充填方法
L. D.(cm)
高度(mm)
培养皿/m
非对称性
流动填充
4.4
200
5710
1.14
轴向力填充
7
199
6063
1.06
流动填充
10
201
5276
1.18
流动填充
30
200
5208
1.17
轴向力填充
45
233
4712
1.09
以下是脉冲注入数据:
可溶性溶媒:1(v/v)% 丙酮
注入量:1% 柱容量
流速:60 cm/h
产品编号产品名称产品规格产品等级
114-01071KANEKA KanCapA™2mL (net 1mL)for Genetic Research
110-01073KANEKA KanCapA™10mL (net 5mL)for Genetic Research
118-01074KANEKA KanCapA™50mL (net 25mL)for Genetic Research