去端肽胶原,蜂窝海绵(Atelocollagen Honeycomb) - 3D培养和3D支架组织工程研究的有用工具
发布时间:2023-11-09 点击数:91
去端肽胶原,蜂窝海绵
Atelocollagen Honeycomb
3D培养和3D支架组织工程研究的有用工具
◆背景
“蜂窝”胶原海绵具有方向统一、均匀的孔(200-400 μm),细胞可以穿透并在其中增殖密集地排列。这种结构有利于营养物质到海绵内为细胞做准备供应,并释放代谢废物和生化产物。细胞能够增殖且填充管腔,形成均匀的细胞团。
去端肽胶原蜂窝海绵 Atelocollagen Honeycomb Sponge (KOU-CSH-10) 为2 mm的立方体,应用于3D细胞 培养物和高密度细胞培养基组织工程细胞支架 | 去端肽胶原蜂窝海绵 Honeycomb Disk 96 (KOU-CSH-96)直径为6 mm圆盘形, 适用于96孔和高通量筛选细胞培养。 |
KOU-CSH-10 : stereoscopic microscope image 立体显微镜图像 | KOU-CSH-96 : stereoscopic microscope image 立体显微镜图像 |
Electron microscope image of Honeycomb sponge 蜂窝海绵的电子显微图像 | Electron microscope image of mouse fibroblast cell culture in 'Honeycomb collagen sponge 蜂窝胶原海绵小鼠成纤维细胞培养的电子显微镜图像 |
◆去端肽胶原的特点
去端肽胶原是由蛋白酶溶解的胶原,但是它的物理性质几乎与天然未加溶的胶原蛋白相同。而去端肽胶原更具有优越的特性。
◆特点与优点
“蜂窝”胶原海绵由高度纯化I型去端肽胶原制备(牛皮来源),并且可以通过胶原酶降解。
◆应用
3D培养
组织工程3D支架研究
◆使用实例
实例 1
NG1RGB人成纤维细胞在蜂窝圆盘(KOU-CSH-96)
饲养层细胞/孔(×103) | 附着细胞于蜂窝圆盘96(×103) | |
10 | 2.2 | |
20 | 5.3 | |
40 | 8.6 | |
细胞增殖:如图所示,在蜂窝圆盘96培养孔中接种。 细胞增殖通过NADH依赖性燃料(WST-8)测定OD值。 | 细胞附着:圆盘培养如图所示,培养一天后转移至新培养孔,并测定细胞数,显示20%的细胞附着。 |
实例 2
胚体在蜂窝海绵支架体内移植后的胚体致畸移植
小鼠肾脏在海绵蜂窝支架移植(EB/+CSH)胚体移植后12周后,没有形成畸胎瘤的迹象,而无KOU-CSH-10(ES/-CSH)的所有小鼠胚体培养产生畸胎瘤。组织学上,移植ES/+CSH与相邻的主肾组织没有明显区别,表明没有具体的诱导自发分化难以区分。
方法:板中培养小鼠胚胎干(ES)细胞进行胰蛋白酶处理,通过尼龙网过滤,接种到96孔板(1×104 细胞/孔),培养5天,形成胚状体(EB)。当EB与蜂窝海绵(KOU-CSH-10)混合,EB迅速、均匀融入KOU-CSH-10的矩阵中。EB/+CSH复合物移植到6周龄小鼠的肾筋膜。
实例 3
体内小鼠胚胎干/间质细胞镶嵌球移植KOU-CSH-10支架后新生毛发。
方法:小鼠ES细胞和小鼠胚胎间充质细胞(MDU1)共培养以产生两种细胞的镶嵌球体。镶嵌球体与KOU-CSH-10去端肽胶原蜂窝海绵混合,在6周龄小鼠的背部肌肉移植。
<参考文献>
1. Suzuki T, et al. Growth inhibition and differentiation of cultured smooth muscle cells depend on cellular crossbridges across the tubular lumen of type I collagen matrix honeycombs. (2009) Microvasc Res. 77(2):143-149.
1. Suzuki T, et al. Growth inhibition and differentiation of cultured smooth muscle cells depend on cellular crossbridges across the tubular lumen of type I collagen matrix honeycombs. (2009) Microvasc Res. 77(2):143-149.
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产品编号 | 产品名称 | 产品规格 |
KOU-CSH-10 | Atelocollagen Honeycomb sponge | 100 mg |
KOU-CSH-96 | Atelocollagen Honeycomb Disc 96 | 25PC |
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