BINKIT(R) NK 细胞扩增套装(外周血单核细胞来源)
发布时间:2023-11-07 点击数:132
BINKIT® NK 细胞扩增套装(外周血单核细胞来源)
◆原理
BINKIT® 可从外周血单核细胞扩增高活性的自然杀伤(NK)细胞。
◆优点·特色
● 无需饲养层细胞,即可从外周血细胞(PBMCs)中扩增 NK 细胞
● 3周时间内 NK 细胞的数目可扩增几百到几千倍
● NK 细胞将获得增强的细胞杀伤性
● 该试剂盒适合 20~50 mL 的外周血细胞
● 无动物来源蛋白(含人白蛋白)
◆案例·应用
<试剂盒组成>
● NK 细胞初始培养基
● NK 细胞初始培养瓶
● NK 细胞传代培养基
● BINKIT® 明细表( PDF 格式)
<未提供材料>
● Ficoll 淋巴细胞分层液(GE Healthcare)
● 无菌 PBS
● FBS 或自体血浆(56℃ 加热 30 分钟以灭活)
<结果>
图 1 使用BINKIT® 进行体外NK细胞扩增
利用 BINKIT® 对外周血单核细胞进行 NK 细胞扩增,CD3-CD56+ 细胞从 15.8% 增加到 88.6% 。
图 2 使用BINKIT® 进行体外NK细胞扩增
利用 BINKIT® 对外周血单核细胞(来自健康自愿者,HD, n=3)进行 NK 细胞扩增。
细胞计数(左)和倍率的变化(右)表明 NK 细胞体在外高效扩增。
图3 使用BINKIT® 进行体外NK细胞扩增
分别以 BINKIT 扩增的 NK 细胞(实线)和从3名志愿者新鲜分离的 NK 细胞(虚线)来检测 NK 细胞对 K562 细胞的杀伤性。
结果表明,扩增后的 NK 细胞对 K562 细胞杀伤性显著增强(P< 0.01)。
<培养步骤>
(1) 准备试剂
在 NK 细胞初始培养基和 NK 细胞传代培养基中,加入5% (v/v) 的热灭活 FBS 或自体血浆。
(2) 制备外周血单核细胞(PBMCs)
通过 Ficoll 密度梯度离心,从人全血中分离外周血单核细胞。
(3)清洗NK细胞初始培养瓶
加入 10 mL PBS 至 NK 细胞初始培养瓶。倾斜培养瓶使 PBS 覆盖整个表面。
将培养瓶中液体全部倒出,小心以免刮伤培养瓶的表面。重复洗涤过程两次。
(4)从PBMCs中培养NK细胞
将 1×106 cells/mL 的 PBMCs 悬浮于 NK 细胞初始培养基中。每 1 mL 细胞悬浮液加入 40 μL 的 NK 细胞初始混合物。
细胞悬液转移至预洗涤的 NK 细胞初始培养瓶,在 37℃,5%的 CO2 培养3天。
(5)更换培养基及传代
同贴壁细胞处理一样,转移时置于锥形离心管,200×g 离心8分钟。
去除上清,将 1×106 cells/mL 细胞悬浮于添加了5% (v/v) 热灭活 FBS 或自体血浆的NK细胞传代培养基中。
转移后的悬浮细胞置于常规培养瓶中,在 37℃,5% CO2 条件下培养。
每2-3天将 0.8×106 cells/mL 细胞置于完全 NK 细胞传代培养基中,进行传代培养。
<建议培养期>
2-3周
※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 |
BIJ-N501-1 | BINKIT® for NK cells expansion from PBMCs BINKIT® NK细胞增殖套装(外周血单核细胞来源) | 1 kit |
BIJ-N501-2 | BINKIT® for NK cells expansion from PBMCs BINKIT® NK细胞增殖套装(外周血单核细胞来源) | 2 kits |
BIJ-N501-4 | BINKIT® for NK cells expansion from PBMCs BINKIT® NK细胞增殖套装(外周血单核细胞来源) | 4 kits |
BIJ-N501-8 | BINKIT® for NK cells expansion from PBMCs BINKIT ® NK细胞增殖套装(外周血单核细胞来源) | 8 kits |