Seebio(R) 两款硫酸葡聚糖钠盐 - 消除细胞聚团就是这么简单

悬浮细胞可能由于各种原因相互附着并发生结团。细胞结团最常见的原因是在细胞裂解之后，培养基中存在游离DNA和细胞碎片，DNA的粘性使细胞和其他碎片聚集成大的团块。

工艺培养过程中分析细胞结团的原因来自两方面：

1 动物细胞本身可能存在固有的细胞结团现象，如CHOS细胞；

2 动物细胞在遇到不良的营养条件和环境，也容易发生细胞聚集现象，以及培养基中Ca2+等离子的浓度也会影响细胞黏附。

细胞微环境会发生恶化如：

抗细胞结团常采用的物质是多硫酸化合物，例如：肝素钠、硫酸乙酰肝素、苏拉明和硫酸葡聚糖。在多种多硫酸盐化合物中，硫酸葡聚糖是在CHO细胞悬浮培养中应用最广泛的抗结团剂。

葡聚糖硫酸钠（Dextran sulfate sodium salt，DSS）是葡聚糖的聚阴离子衍生物，由葡聚糖和氯磺酸的酯化反应形成，以钠盐形式提供，并通过添加少量磷酸盐进行稳定。

2016年，科学家研究了硫酸葡聚糖的三种不同分子量（4000Da、15000Da和40000Da，其对应的S比例分别为3-6%、17-19%和15-19%），以及不同浓度（0.1-1.0g/L）对两种不同重组CHO细胞（CHO-K1细胞和DG44细胞）的生长和单克隆抗体产量影响。并同时评估添加硫酸葡聚糖对单抗的关键质量属性（如聚体、电荷变化和N-糖基化等)的影响。

前期研究发现，采用200000Da的硫酸葡聚糖，无论使用哪种浓度（0.1-1.0g/L），都会使最大活细胞密度和抗体浓度降低20-30％。说明采用200000Da的硫酸葡聚糖对细胞来说是有害。添加上述不同分子量不同浓度的硫酸葡聚糖对于CHOK1细胞，可以显著维持培养后期细胞密度和活力，需要注意的是最终抗体表达并未对应提高。

而对于DG44细胞添加硫酸葡聚糖，尤其是40,000Da分子量对于DG44细胞，细胞聚集会大大降低。并且显著提高了抗体产物浓度。

另外通过硫酸葡聚糖对抗体质量属性的影响研究表明对于DG44细胞添加4000Da和15000 Da硫酸葡聚糖对单克隆抗体的电荷异构体无影响(P<0.05)，只有添加40,000Da硫酸葡聚糖才显著降低碱性电荷异构体(P<0.05)；

添加硫酸葡聚糖对单克隆抗体的质量属性(聚体、电荷异构体和N -糖基化)没有负面影响，甚至可以对部分质量属性产生积极影响，如影响单克隆抗体的电荷异构体，降低碱峰。

总之，对于细胞生长、抗体产量和质量的影响取决于硫酸葡聚糖的分子量、浓度和CHO细胞系的选择。因此，针对不同CHO细胞系，建议优化最佳的硫酸葡聚糖的分子量和浓度，以最大发挥硫酸葡聚糖在单克隆抗体生产中的有益作用。

1、 质量优良：纯度高，含硫量15~20%；

2、 稳定性高：聚阴离子复合物，可溶于水，形成无色溶液，形似天然粘多糖；

3、 内毒素低：低于5EU/g，对细胞伤害较小。

3、 性能突出: 能有效降低CHO、T细胞培养结团。

西宝生物可以提供各种规格的硫酸葡聚糖钠，平均分子量从2,000~500,000，欢迎致电400-021-8158.