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体外诊断中交联剂的用途与选择

发布时间:2022-06-08 点击数:1204
蛋白质交联剂是一类小分子化合物,具有2个或者更多的针对特殊基团(-NH2、-COOH、-HS等)的反应性末端,可以和2个或者更多的分子分别偶联,从而使这些分子结合在一起。体外诊断中,交联剂常用于载体蛋白与半抗原的连接,蛋白质或其他分子的固相化,抗体的标记。西宝生物提供优质的交联剂及相关产品,详情咨询:400-021-8158
蛋白质交联剂的应用
载体蛋白与半抗原的连接
半抗原只有反应原性而没有免疫原性。而将病毒包被蛋白的一段多肽序列(半抗原)可以和载体蛋白连接后制成疫苗,激发免疫反应。另外也可以通过这种方法制备单克隆抗体,并利用此单抗返回找到大分子蛋白上的抗原结合位点。在连接二者的操作中,较低的半抗原-载体蛋白摩尔比会带来更高的抗体亲和力。此外将半抗原连接在载体蛋白中间的氨基酸上比连接在其末端时产生的的抗体效价更高。
蛋白质或其他分子的固相化
将蛋白质通过共价键结合在磁珠,96孔板,玻璃等固体基质上,以减少洗脱过程中的损失。
抗体的标记
将抗体与酶,荧光基团或者生物素连接用于定量测量或者定位观察。抗体标记与修饰之前,需要用固定化的抗原纯化。为了避免抗体结合抗原的位点被封闭,选择抗体重链上合适位置的的氨基酸就比较重要。标记酶可以连接在抗体铰链区打开形成的二硫键上,或者或者抗体的非特异性片段上。
蛋白质交联剂的分类
蛋白质交联剂根据其基团反应性末端的数量和差异,可分为:
· 同源双官能团的交联剂-有两个相同的反应性末端;一步反应;分子内交联、聚合。
· 异源双官能团的交联剂-有两个不同的反应性末端;两步连续反应,较不稳定的基团先反应;可减少分子内交联、聚合。
蛋白交联剂选择考虑因素
交联剂的水溶性;
基团反应性末端特异性;
选择同双官能团或异双官能团交联剂;
热反应基团或光反应基团;
间臂长度;
交联后分子是否可分解;
交联剂中是否含有部分可以放射性标记或其他标记的成分,比如碘化标记。
产品列表
货号
产品名称
CAS
间隔臂长(Å)
蛋白结合基团
反应基团
膜穿透性
溶于水
可断裂性
同源或异源
3,3-二硫代二丙酸二(N-羟基丁二酰亚胺)酯(DSP)
57757-57-0
12
氨基
NHS酯
Yes
No
还原剂(巯基)
同源
3-马来酰亚胺丙酸N-羟基琥珀酰亚胺酯(BMPS)
55750-62-4
5.9
氨基、巯基
NHS酯、马来酰亚胺
Yes
No
No
异源
3-马来酰亚胺基苯甲酸琥珀酰亚胺酯(MBS)
58626-38-3
9.9
氨基、巯基
NHS酯、马来酰亚胺
Yes
No
No
异源
4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐(Sulfo-SMCC)
92921-24-9
11.6
氨基、巯基
NHS酯、马来酰亚胺
Yes
Yes
No
异源
4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯(SMCC)
64987-85-5
11.6
氨基、巯基
NHS酯、马来酰亚胺
Yes
No
No
异源
4-马来酰亚胺基丁酸-N-琥珀酰亚胺酯(GMBS)
80307-12-6
6.8
氨基、巯基
NHS酯、马来酰亚胺
Yes
No
No
异源
6-(马来酰亚胺基)己酸琥珀酰亚胺酯(EMCS)
55750-63-5
9.4
氨基、巯基
NHS酯、马来酰亚胺
Yes
No
No
异源
6-马来酰亚胺基己酸(EMCA)
55750-53-3
9.4
巯基
马来酰亚胺
Yes
Yes
No
同源
3,3'-二硫代双(磺酸琥珀酰亚氨基丙酸酯)(DTSSP)
81069-02-5
12
氨基
NHS酯
No
Yes
还原剂(巯基)
同源
N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐(Sulfo-NHS)
106627-54-7
0
氨基、羧基
碳化二亚胺
No
Yes
No
异源
马来酰亚胺己酸磺基琥珀酰亚胺酯(Sulfo-EMCS)
215312-86-0
9.4
氨基、巯基
NHS酯、马来酰亚胺
Yes
Yes
No
异源
双琥珀酰亚胺辛二酸酯(DSS)
68528-80-3
11.4
氨基
NHS酯
Yes
No
No
同源
乙二醇双(丁二酸N-羟基琥珀酰亚胺酯)(EGS)
70539-42-3
16.1
氨基
NHS酯
Yes
No
羟胺
同源
1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)
25952-53-8
0
氨基、羧基
碳化二亚胺
No
Yes
No
异源
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生物素交联剂具有多级放大作用,可有效提高检测灵敏度和精确度,在体外诊断、医药研发等领域被广泛使用。生物素各种 NHS 酯试剂在长度、溶解度、细胞通透性和可裂解性方面有所不同。
货号
产品名称
CAS
N-琥珀酰亚氨基6-生物素氨己酸(Biotin-AC5-OSU)
72040-63-2
6-[生物素酰氨基]己酸磺基琥珀酰亚胺酯
127062-22-0
6-生物素氨基己酸
72040-64-3
N-琥珀酰亚氨-生物素
35013-72-0
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