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猴痘来袭,西宝生物助力猴痘病毒检测试剂盒快速开发

发布时间:2022-06-08 点击数:271
自5月6日,英国先确诊猴痘病例以来,猴痘病毒已波及美国、加拿大、澳大利亚等多国。据世卫组织介绍,部分猴痘病毒的病死率可能达10%。
截到20日,欧洲不少于9国报告猴痘确诊病例,包括英国、比利时、法国、意大利、西班牙、葡萄牙、德国、荷兰和瑞典。欧洲以外,美国、加拿大和澳大利亚同样报告猴痘确诊病例。
什么是猴痘病毒?
猴痘是痘病毒科正痘病毒属的一种。是一种罕见的病毒性人畜共患病(从动物传播给人的病毒),其病原体猴痘病毒是一种DNA(脱氧核糖核酸)病毒,属于痘病毒科正痘病毒属,与在人类历史上曾肆虐数千年的天花病毒是“近亲”。猴痘病毒于1958年被发现,当时一组用于研究的猴子中出现“痘状”传染病,因此得名。自世卫组织1980年宣布人类彻底消灭天花以来,猴痘病毒已成为对公共卫生影响较大的正痘病毒。
猴痘是一种病毒性人畜共患病。猴痘病毒可通过密切接触由动物传染给人,虽不易发生人际传播,但与患者密切接触也可能感染。人感染猴痘的初期症状包括发烧、肌肉酸痛、背痛、淋巴结肿大等,之后可发展为面部和身体大范围皮疹。多数患者会在数周内康复,但也有患者出现严重症状或死亡。
猴痘病毒如何传播?
猴痘的主要传播方式为直接密切接触和呼出的大量飞沫传播。被已感染的动物咬伤,或直接接触被感染动物的血液、体液、猴痘病损处,或食用未全煮熟的受感染动物的肉等,都可以实现猴痘病毒由动物感染人类。
人类之间的二次传播主要由于密切接触了感染者的呼吸道分泌物、皮肤损伤,或被患者体液或病变组织污染的物品(如患者皮疹破裂后流出的液体沾染的衣物、床单等)。猴痘病毒能在呼吸道飞沫中存在,但通常需要长时间面对面接触才能传播。
据世卫组织介绍,猴痘病毒感染症状与天花相似,但临床严重程度较轻,潜伏期通常为6-13天,可能长达21天。“矢量”中心的科研人员介绍说,由于多种痘病毒具有“交叉免疫”特点,人接种天花疫苗对防治猴痘也有效。
5月21日,复旦大学附属华山医院的官微“华山感染”发文指出,对于猴痘病毒,我国输入性病例的风险会相应增加,建议应着手储备疫苗和抗病毒药物,以免出现病例后处于被动局面。各国对猴痘的警惕,纷纷提上日程。据路透社首尔报道,美国总统拜登22日表示,猴痘疫情是“所有人都应关切”的事。
猴痘病毒的临床检测
俄罗斯“矢量”病毒学与生物技术科学中心科研人员研制出了一种自动操作的检测试剂盒,可用于检测包括猴痘病毒在内的正痘病毒。与此同时,国内的医疗器械也正在研发相关检测器械和试剂,反应迅速。日前,有多家诊断试剂公司官网显示已正在加紧研发猴痘病毒相关检测试剂盒包括但不仅只(PCR-荧光探针法)这种方法可通过特异性检测猴痘病毒的核酸片段,快速鉴别出猴痘病毒。已有部分企业正在推进该产品的海外注册工作。
西宝生物时刻关注全球猴痘疫情发展,作为深耕于生命科学领域的一家上游供应商,西宝长期为IVD企业提供高品质、高性价比的原料,积极应对全球猴痘疫情,助力猴痘病毒检测。西宝生物可提供PCR-荧光探针法研发生产用原料,欢迎垂询400-021-8158!
荧光定量PCR原理
荧光定量PCR较早称TaqMan PCR,后来也叫Real-Time PCR,是美国PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术。该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料来实现其定量功能的。其原理:随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线图。
qPCR可分为荧光染料法(SYBR Green Ⅰ法为代表)和荧光探针法(TaqMan法为代表)。
荧光探针法(Taqman 技术):TaqMan探针法qPCR是使用TaqMan荧光探针进行荧光检测的方法。其基础原理是PCR扩增时,加入一对引物的同时再加入一个特异性的荧光探针。.该探针为一直线型的寡核苷酸,两端分别标记一个荧光报告基团和一个荧光淬灭基团,探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收,PCR 仪检测不到荧光信号; PCR扩增时(在延伸阶段),Taq 酶的 5' - 3' 切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条 DNA 链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与 PCR 产物形成同步,这也是定量的基础所在。
TaqMan水解探针作用机理图
TaqMan水解探针作用机理图
TaqMan探针法qPCR优点
特异性高、定量准确 — 荧光探针只与目的序列结合,理论上探针法的荧光信号只来源于目的序列,即不受非特异性产物的影响,因此,TaqMan探针法qPCR的特异性很高,定量准确。
实验耗时短 — 探针法qPCR的高特异性,无需再设置熔解曲线检测扩增产物的特异性如何,大大缩短了实验时间。
多重反应可兼容,适用性强 — 不同波长的荧光报告基团可以标记不同的探针,因此可以在同一个反应体系中利用不同荧光标记的探针同时检测多个靶标,达到节省实验成本的目的。
Taqman探针法荧光PCR相关试剂原料
类型
产品描述
产品名称
货号
备注
样本提取与纯化
核酸释放剂
核酸释放剂
Nucleic Acid Release Reagent
DAA1404A
 
核酸释放剂常用组分
三羟甲基氨基甲烷盐酸盐(TRIS-HCl)
ACC0029A
缓冲盐
Guanidine Thiocyanate
异硫氰酸胍
ACH002A
蛋白质变性剂
Guanidine hydrochloride 盐酸胍
ACH0011A
核酸酶强抑制剂
Proteinase K 蛋白酶K
EBY0027I
高比活性
Sodium dodecyl sulfate
十二烷基硫酸钠(SDS)
ACH0017A
阴离子去垢剂
Urea 尿素
ACH0029D
 
乙二胺四乙酸二钠盐(EDTA-2Na)
ACH0010A
重要的螯合剂
探针法qPCR检测预混液
超高灵敏度
Seebio® TaqMan multiplex qPCR master mix(探针法)
DAA1400A
单重/多重,预混液,实验方便
全预混稳定性加强版(含UDG Mg2+和dNTP)
Seebio® Enhan TaqMan Multiplex qPCR Master Mix (UDG plus)
(2×Mix预混合试剂包含反应缓冲液和酶mix,已包含Mg2+和dNTP)
DAA1401A
单酶+buffer + dNTPs and Mg2+可以根据实验,优化酶,dNTP,Mg2+的投入量
单酶
热启动Taq酶
Seebio®HotStart Direct Taq DNA Polymerase
DAA1402A
 
Bst酶
Bst Ⅱ plus DNA Polymerase
DAA0792A
 
热敏UDG酶
Uracil DNA Glycosylase (UDG), heat-labile
DAA0230A
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