皮质醇（Cortisol）-磁微粒化学发光法（AE/AP） /荧光免疫层析解决方案
发布时间：2026-04-21 点击数：2
1. 项目背景
皮质醇，常被称为“压力激素”，是人体肾上腺皮质分泌的最重要的糖皮质激素。它作为下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴）的核心终末产物，广泛参与调节机体新陈代谢、应激反应、免疫功能、血压和昼夜节律等几乎所有的生理过程。其水平的精确评估，对于诊断库欣综合征（皮质醇增多症）、肾上腺皮质功能减退症等一系列内分泌及全身性疾病至关重要。
1.1皮质醇的生理学与调节机制
1.1.1基本生理功能
皮质醇由肾上腺皮质的束状带合成与分泌。作为一种类固醇激素，其生理作用广泛而深入：代谢调节、应激反应、免疫调节、其他作用。
1.1.2分泌节律与调节
皮质醇的分泌并非恒定，主要受HPA轴精密调控，并呈现两个显著特征：昼夜节律及应激性分泌。
在血液循环中，约90%的皮质醇与皮质醇转运球蛋白结合，少量与白蛋白结合，仅少数游离皮质醇具有生物活性。CBG水平的变化（如妊娠、服用雌激素药物时升高，肝硬化、肾病综合征时降低）会影响总皮质醇的测定值，但不影响游离皮质醇水平。
1.2.皮质醇检测的临床意义
检测皮质醇水平主要用于评估HPA轴功能，其异常与多种疾病状态相关。
1.2.1 皮质醇水平升高
主要疾病：病理性升高最常见于库欣综合征，即各种原因（如垂体ACTH瘤、肾上腺腺瘤或异位ACTH综合征）导致的长期皮质醇过多。典型临床表现包括向心性肥胖、满月脸、水牛背、皮肤紫纹、高血压、高血糖、肌肉无力及骨质疏松等。
1.2.2 皮质醇水平降低
主要疾病：病理性降低主要提示肾上腺皮质功能减退症。
1.3 指南推荐-摘自《英国NICE于2024年发布的《肾上腺皮质功能减退：识别与管理》指南（NG243）》
1.3.1 NICE指南的证据综述表明，晨间血清皮质醇在筛查继发性肾上腺皮质功能减退时，其敏感性和特异性在特定阈值下能达到临床可接受的水平。例如，一项研究显示，以260 nmol/L为阈值，诊断的敏感性为0.73，特异性为0.72。
1.3.2 指南特别强调了避免单一随机皮质醇检测的做法，因为其结果受昼夜节律和应激影响极大，解读困难，容易导致不必要的转诊。
1.3.3 除了血清检测，指南也纳入了唾液皮质醇和皮质酮作为有价值的筛查工具，特别是对于门诊或家庭监测的患者。
2. 性能表现
针对皮质醇（Cortisol）的检测，西宝生物推出1株Cortisol抗体、1株Cortisol抗原-BSA及1款Cortisol标准品。
具体性能如下（以下评估仅代表在西宝生物的工艺体系下的验证，建议客户根据自身工艺进行更为详细的验证）。
2.1化学发光（AE）平台
组合1：皮质醇（Cortisol）抗体（货号：EKY0956B）包被羧基磁珠+皮质醇（Cortisol）抗原-BSA（货号：EKY0955B）标记吖啶酯；
组合2：皮质醇（Cortisol）抗体（货号：EKY0956B）标记生物素+皮质醇（Cortisol）抗原-BSA（货号：EKY0955B）标记吖啶酯+链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）；
线性范围：0.1μg/dL-60μg/dL；最低检出限：0.1μg/dL。
2.2化学发光（AP）平台
组合3：皮质醇（Cortisol）抗体（货号：EKY0956B）包被羧基磁珠+皮质醇（Cortisol）抗原-BSA（货号：EKY0955B）标记碱性磷酸酶；
组合4：皮质醇（Cortisol）抗体（货号：EKY0956B）标记生物素+皮质醇（Cortisol）抗原-BSA（货号：EKY0955B）标记碱性磷酸酶+链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）；
线性范围：0.1μg/dL-60μg/dL；最低检出限：0.1μg/dL。
2.3荧光免疫层析平台
组合5：皮质醇（Cortisol）抗体（货号：EKY0956B）标记荧光微球+皮质醇（Cortisol）抗原-BSA（货号：EKY0955B）划膜；
线性范围：2μg/dL-60μg/dL；最低检出限：2μg/dL。
2.4各组分稳定性评估
2.4.1 采用皮质醇磁珠稀释液（货号：DCD0566B）将磁珠包被的皮质醇浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；
2.4.2 采用皮质醇吖啶酯稀释液（货号：DCD0566C）；含复合酶保护剂AFP（货号：ACE0074A）将吖啶酯标记的皮质醇-BSA浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；
2.4.3 采用皮质醇碱性磷酸酶稀释液（货号：DCD0566D；含蛋白保护剂GH（货号：DCL0009A），或者含（酶解深水鱼皮明胶（货号：ACH0085J）将碱性磷酸酶标记的皮质醇-BSA浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；
2.4.4 采用SA稀释液（货号：DCD0566B）将SA磁珠浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；
2.4.5 采用皮质醇生物素稀释液（货号：DCD0566B）将生物素标记的皮质醇抗体浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；
2.4.6 采用皮质醇标准品稀释液（货号：DCD0566E）将皮质醇标准品配制成梯度进行37℃热稳定性实验；
如表1所示：
a.磁珠包被皮质醇抗体工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明磁珠包被皮质醇抗体工作液热稳定性良好；
b.吖啶酯标记皮质醇-BSA工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±15%左右，表明吖啶酯标记皮质醇-BSA工作液热稳定性良好；
c.碱性磷酸酶标记皮质醇-BSA工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明碱性磷酸酶标记皮质醇抗体工作液热稳定性良好；
d.SA磁珠单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明SA磁珠的热稳定性良好。
e.皮质醇生物素单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明皮质醇生物素热稳定性良好。
f.皮质醇标准品梯度单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明皮质醇标准品梯度热稳定性良好。
表1 皮质醇各组分工作液及标准品热稳定性7天数据
序号 | 皮质醇标准品稀释浓度（ug/dL） | 磁珠-包被皮质醇抗体工作液37℃热加速 7天变化 | 吖啶酯-标记皮质醇-BSA工作液37℃热加速 7天变化 | AP酶-标记皮质醇-BSA工作液37℃热加速 7天变化 | SA磁珠工作液37℃热加速 7天变化 | 生物素标记皮质醇抗体工作液37℃热加速 7天变化 | 皮质醇标准品37℃热加速 7天变化 |
S0 | 0 | 4.8% | -10.1% | 1.3% | 7.2% | 1.2% | 4.0% |
S1 | 0.05 | -1.3% | -13.3% | 1.4% | 9.8% | 0.9% | 5.5% |
S2 | 0.2 | 7.0% | -14.0% | 0.3% | 8.9% | -4.4% | 7.8% |
S3 | 1 | 1.1% | -13.8% | 0.0% | 9.1% | 2.4% | 7.4% |
S4 | 5 | 8.1% | -16.6% | -7.8% | 7.5% | -2.3% | 3.5% |
S5 | 50 | 6.1% | -15.5% | -6.7% | 2.5% | -2.4% | 7.6% |
S6 | 100 | 5.9% | -15.9% | -8.3% | 3.2% | 2.4% | 4.2% |
平均变化 （不含S0） | 4.5% | -14.2% | -2.8% | 6.9% | -0.5% | 6.0% | |
3.临床相关性
3.1化学发光（AE）平台：
3.1.1西宝生物发光（AE）平台皮质醇（Cortisol）原料配对组合1与安图生物的皮质醇试剂（磁微粒化学发光法）赋值的临床样本相关性R2＞0.90，相关性良好；
3.1.2西宝生物发光（AE）平台皮质醇（Cortisol）原料配对组合2与安图生物的皮质醇试剂（磁微粒化学发光法）赋值的临床样本相关性R2在0.95左右，相关性良好；
3.2化学发光（AP）平台：
3.2.1西宝生物发光（AP）平台皮质醇（Cortisol）原料配对组合3与安图生物的皮质醇试剂（磁微粒化学发光法）赋值的临床样本相关性R2＞0.90，相关性良好；
3.2.2西宝生物发光（AP）平台皮质醇（Cortisol）原料配对组合4与安图生物的皮质醇试剂（磁微粒化学发光法）赋值的临床样本相关性R2＞0.90，相关性良好；
3.3荧光免疫层析平台：
西宝生物荧光免疫层析平台皮质醇（Cortisol）原料配对组合5与安图生物的皮质醇试剂（磁微粒化学发光法）赋值的临床样本相关性R2在0.95左右，相关性良好。
4. 测试方案
4.1化学发光（AE）平台
4.1.1 皮质醇原料配对组合1（两试剂模式）
待测抗原:皮质醇标准品（货号：DKY0348A）；
样本:样品加样量20ul；
试剂1：皮质醇抗体（货号：EKY0956B）包被-磁珠稀释物，用量50ul/测试；
试剂2：皮质醇抗原-BSA（货号：EKY0955B）标记-吖啶酯稀释物，用量50ul/测试；
反应条件：
第一步：20ul样本+50ul试剂1，37℃孵育5min；
第二步：加入50ul 试剂2，37℃孵育5min，清洗；
第二步：加入预激发液及激发液，进行测试。
4.1.2 皮质醇原料配对组合2（三试剂模式）
待测抗原:皮质醇标准品（货号：DKY0348A）；
样本:样品加样量20ul；
M试剂：链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）稀释物，用量50ul/测试；
试剂1：皮质醇抗体（货号：EKY0956B）标记-生物素稀释物，用量50ul/测试；
试剂2：皮质醇抗原-BSA（货号：EKY0955B）标记-吖啶酯稀释物，用量50ul/测试；
反应条件：
第一步：20ul样本+50ul M试剂+50ul试剂1，37℃孵育5min；
第二步：加入50ul 试剂2，37℃孵育5min，清洗；
第三步：加入预激发液及激发液，进行测试。
测试使用发光仪器:科斯迈SMART 500S。
4.2化学发光（AP）平台
4.2.1皮质醇原料配对组合3（两试剂模式）
待测抗原:皮质醇标准品（货号：DKY0348A）；
样本:样品加样量20ul；
试剂1：皮质醇抗体（货号：EKY0956B）包被-磁珠稀释物，用量50ul/测试；
试剂2：皮质醇抗原-BSA（货号：EKY0955B）标记-碱性磷酸酶稀释物，用量50ul/测试；
反应条件：
第一步：20ul样本+50ul试剂1，37℃孵育10min；
第二步：加入50ul 试剂2，37℃孵育5min，清洗；
第二步：加入底物，进行测试。
4.2.2皮质醇原料配对组合4（三试剂模式）
待测抗原:皮质醇标准品（货号：DKY0348A）；
样本:样品加样量20ul；
M试剂：链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）稀释物，用量50ul/测试；
试剂1：皮质醇抗体（货号：EKY0956B）标记-生物素稀释物，用量50ul/测试；
试剂2：皮质醇抗原-BSA（货号：EKY0955B）标记-碱性磷酸酶稀释物，用量50ul/测试；
反应条件：
第一步：20ul样本+50ul M试剂+50ul试剂1，37℃孵育10min；
第二步：加入50ul 试剂2，37℃孵育5min，清洗；
第三步：加入底物，进行测试。
测试使用发光仪器:迎凯Shine i2900。
4.3荧光免疫层析平台
皮质醇原料配对组合5
待测抗原:皮质醇标准品（货号：DKY0348A）；
反应条件：10ul样品+100ul稀释液混匀，上样，反应时间（10min-15min）；
测试使用荧光仪器:和迈FIC-S100。
5.产品信息
产品名称 | 货号 | 推荐配对 |
皮质醇（Cortisol）抗体 | EKY0956B | 皮质醇配对： 皮质醇（Cortisol）抗体（货号：EKY0956A）包被羧基磁珠+皮质醇（Cortisol）抗原-BSA（货号：）标记吖啶酯；（发光配对组合1） 皮质醇（Cortisol）抗体（货号：EKY0956A）标记生物素+皮质醇（Cortisol）抗原-BSA（货号：）标记吖啶酯+链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）（发光配对组合2） 皮质醇（Cortisol）抗体（货号：EKY0956A）包被羧基磁珠+皮质醇（Cortisol）抗原-BSA（货号：）标记碱性磷酸酶；（发光配对组合3） 皮质醇（Cortisol）抗体（货号：EKY0956A）标记生物素+皮质醇（Cortisol）抗原-BSA（货号：）标记碱性磷酸酶+链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）；（发光配对组合4） 皮质醇（Cortisol）抗体（货号：EKY0956A）标记荧光微球+皮质醇（Cortisol）抗原-BSA（货号：）划膜；（荧光配对组合5） |
皮质醇（Cortisol）抗原-BSA | EKY0955B | |
皮质醇（Cortisol）标准品 | DKY0348A | |
皮质醇（Cortisol）抗体（货号：）包被羧基磁珠浓缩液 | DKY1387A | |
皮质醇（Cortisol）抗体（货号：）标记生物素浓缩液 | DKY1387B | |
皮质醇（Cortisol）抗原-BSA（货号：）标记吖啶酯浓缩液 | DKY1387C | |
皮质醇（Cortisol）抗原-BSA（货号：）标记碱性磷酸酶浓缩液 | DKY1387D | |
皮质醇（Cortisol）抗体（货号：）标记荧光微球浓缩液 | DKY1387E | |
AMPPD 发光底物液（即用型） | DCD0517B | |
APS-5 发光底物液（即用型） | ECD0532M | |
羧基磁性微球，1um | DEG0852A | |
时间分辨荧光微球，羧基（300nm） | AEG0789C | |
皮质醇磁珠稀释液 | DCD0566B | |
皮质醇生物素稀释液 | DCD0566B | |
SA稀释液 | DCD0566B | |
皮质醇吖啶酯稀释液 | DCD0566C | |
皮质醇碱性磷酸酶稀释液 | DCD0566D | |
皮质醇（Cortisol）标准品稀释液 | DCD0566E | |
链霉亲和素磁性微球，1.5um | DEG0814A-10ml | |
蛋白保护剂GH | DCL0009A | 推荐使用浓度10%左右 |
复合酶保护剂AFP | ACE0074A | 推荐使用浓度5%左右 |
酶解深水鱼皮明胶 | ACH0085J | 推荐使用浓度1%-10%。 |