人附睾蛋白4（HE4）-磁微粒化学发光法（AE/AP） /荧光免疫层析解决方案
发布时间：2026-02-28 点击数：1
1.项目背景
1.1临床介绍-摘自《绝经后卵巢肿物诊治的中国专家共识（2021年版）》
1.1.1背景简介
人附睾蛋白4（HE4）是一种由乳清酸性蛋白基因家族编码的分泌型糖蛋白，最初在人附睾远端上皮细胞中发现，正常组织中表达水平极低，但在卵巢癌等恶性肿瘤中显著高表达，因此被广泛应用于卵巢癌的早期筛查、诊断和病情监测。
1.1.2临床意义
绝经后卵巢肿物的诊断
血清学标志物检测推荐及共识：CA125可作为绝经后卵巢肿物的初选血清肿瘤标志物，若与人附睾蛋白4（human epididymis protein 4，HE4）联合检测，特异度升高；其他肿瘤标志物如CA19-9、甲胎蛋白（AFP）、癌胚抗原（CEA）、CA724、乳酸脱氢酶（LDH）、β-hCG等可以协助诊断卵巢恶性肿瘤，但不推荐多种肿瘤标志物串联检测用于最初评估（2A类推荐）。
恶性肿瘤风险指数（RMI）和卵巢恶性肿瘤风险模型（ROMA）
推荐及共识：RMI评分系统可以协助判断卵巢恶性肿瘤的风险，绝经后RMI≥200者需进一步行腹盆腔CT评估。ROMA风险分层有利于卵巢肿物分层管理（2A类推荐）。ROMA则是将CA125、HE4水平以及绝经状态相结合，用于预测卵巢上皮性癌的发病风险。ROMA预测卵巢癌具有较高的敏感度，可用于绝经后卵巢肿物的风险分层。如排除交界性卵巢肿瘤和非上皮性恶性肿瘤，RMI和ROMA预测绝经后女性附件肿物特异度相似。
2.性能表现
针对HE4的检测，西宝生物推出2株HE4抗体及1款HE4抗原。
具体性能如下（以下评估仅代表在西宝生物的工艺体系下的验证，建议客户根据自身工艺进行更为详细的验证）。
2.1化学发光（AE）平台
组合1：人附睾蛋白4(HE4)单抗（货号：EKY0024I）包被羧基磁珠+人附睾蛋白4(HE4)单抗（货号：EKY0024J）标记吖啶酯；
线性范围：15pmol/L-1500pmol/L；最低检出限：15pmol/L；HOOK：40000pmol/L。
2.2化学发光（AP）平台
组合2：人附睾蛋白4(HE4)单抗（货号：EKY0024I）包被羧基磁珠+人附睾蛋白4(HE4)单抗（货号：EKY0024J）标记碱性磷酸酶；
线性范围：15pmol/L-1500pmol/L；最低检出限：15pmol/L；HOOK：40000pmol/L。
2.3荧光免疫层析平台
组合3：人附睾蛋白4(HE4)单抗（货号：EKY0024I）标记荧光微球+人附睾蛋白4(HE4)单抗（货号：EKY0024J）划膜；
线性范围：15pmol/L-1500pmol/L；最低检出限：15pmol/L；HOOK：40000pmol/L。
2.4各组分稳定性评估
2.4.1采用HE4磁珠稀释液（化学发光）将磁珠包被的HE4抗体浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；
2.4.2采用HE4吖啶酯稀释液（化学发光）将吖啶酯标记的HE4抗体浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；
2.4.3采用HE4碱性磷酸酶稀释液（化学发光）将碱性磷酸酶标记的HE4抗体浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；
如表1所示：
a.磁珠包被HE4抗体工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明磁珠包被HE4抗体工作液热稳定性良好；
b.吖啶酯标记HE4抗体工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±15%以内，表明吖啶酯标记HE4抗体工作液热稳定性良好；
c.碱性磷酸酶标记HE4抗体工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±15%以内，表明碱性磷酸酶标记HE4抗体工作液热稳定性良好。
表1 HE4各组分工作液热稳定性7天数据
序号 | HE4抗原稀释浓度（pmol/L） | 磁珠-包被HE4抗体工作液37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值均值差异 | 吖啶酯标记HE4抗体工作液37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值均值差异 | 碱性磷酸酶标记HE4抗体工作液37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值均值差异 |
S0 | 0 | -3.3% | 3.5% | -4.5% |
S1 | 15 | 8.7% | 9.9% | -10.1% |
S2 | 50 | 6.3% | 11.8% | -12.5% |
S3 | 100 | 4.5% | 12.7% | -13.2% |
S4 | 500 | 4.9% | 10.1% | -11.4% |
S5 | 1500 | -0.9% | 7.3% | -10.0% |
平均变化（不含S0） | 4.7% | 10.4% | -11.4% | |
3.临床相关性
3.1化学发光（AE）平台：
西宝生物发光（AE）平台HE4抗体配对组合1与罗氏诊断的HE4试剂（电化学发光法）赋值的低值（≤200pmol/L）临床样本相关性R2＞0.95，相关性较好；与罗氏诊断的HE4试剂（电化学发光法）赋值的高值（＜1500pmol/L）临床样本相关性R2＞0.95，相关性良好。
3.2化学发光（AP）平台：
西宝生物发光（AP）平台HE4抗体配对组合2与罗氏诊断的HE4试剂（电化学发光法）赋值的低值（≤200pmol/L）临床样本相关性R2＞0.95，相关性较好；与罗氏诊断的HE4试剂（电化学发光法）赋值的高值（＜1500pmol/L）临床样本相关性R2＞0.95，相关性良好。
3.3荧光免疫层析平台：
西宝生物荧光免疫层析HE4抗体配对组合3与罗氏诊断的HE4试剂（电化学发光法）赋值的低值（≤200pmol/L）临床样本相关性R2＞0.95，相关性较好；与罗氏诊断的HE4试剂（电化学发光法）赋值的高值（＜1500pmol/L）临床样本相关性R2＞0.95，相关性良好。
4.测试方案
4.1化学发光（AE）平台
HE4抗体配对组合1
待测抗原:重组人附睾蛋白4(HE4）抗原（货号：EKM3019B）；
样本:样品加样量10ul；
试剂1：人附睾蛋白4(HE4)单抗（货号：EKY0024I）包被-磁珠稀释物，用量50ul/测试；
试剂2：人附睾蛋白4(HE4)单抗（货号：EKY0024J）标记-吖啶酯稀释物，用量50ul/测试；
反应条件：
第一步：10ul样本+50ul试剂1+50ul 试剂2，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入预激发液及激发液，进行测试。
测试使用发光仪器:科斯迈SMART 500S。
4.2化学发光（AP）平台
HE4抗体配对组合2：
待测抗原:重组人附睾蛋白4(HE4）抗原（货号：EKM3019B）；
样本:样品加样量10ul；
试剂1：人附睾蛋白4(HE4)单抗（货号：EKY0024I）包被-磁珠稀释物，用量50ul/测试；
试剂2：人附睾蛋白4(HE4)单抗（货号：EKY0024J）标记-碱性磷酸酶稀释物，用量50ul/测试；
反应条件：
第一步：10ul样本+50ul试剂1+50ul试剂2，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入底物，进行测试。
测试使用发光仪器:迎凯Shine i2900。
4.3荧光免疫层析平台
HE4抗体配对组合2：
待测抗原:重组人附睾蛋白4(HE4）抗原（货号：EKM3019B）；
反应条件：10ul样品+100ul 稀释液混匀，上样，反应时间（10min-15min）；
测试使用荧光仪器:和迈FIC-S100。
5.产品信息
产品名称 | 货号 | 推荐配对 |
人附睾蛋白4(HE4)单抗 | EKY0024I | HE4配对： HE4单抗（货号：EKY0024I）包被羧基磁珠+HE4单抗（货号：EKY0024J）标记吖啶酯（发光配对组合1） HE4单抗（货号：EKY0024I）包被羧基磁珠+HE4单抗（货号：EKY0024J）标记碱性磷酸酶（货号：DCE0108L）（发光配对组合2） HE4单抗（货号：EKY0024I）标记荧光微球+HE4单抗（货号：EKY0024J）划膜（荧光配对组合3） |
人附睾蛋白4(HE4)单抗 | EKY0024J | |
重组人附睾蛋白4(HE4）抗原 | EKM3019B | |
人附睾蛋白4(HE4)单抗（货号：EKY0024I）包被羧基磁珠浓缩液 | DKY1382A | |
人附睾蛋白4(HE4)单抗（货号：EKY0024I）标记荧光微球浓缩液 | DKY1382B | |
人附睾蛋白4(HE4)单抗（货号：EKY0024J）吖啶酯浓缩液 | DKY1382C | |
人附睾蛋白4(HE4)单抗（货号：EKY0024J）标记碱性磷酸酶浓缩液 | DKY1382D | |
AMPPD 发光底物液（即用型） | DCD0517B | |
APS-5 发光底物液（即用型） | ECD0532M | |
羧基磁性微球，1um | DEG0852A | |
时间分辨荧光微球，羧基（300nm） | AEG0789C |