mESF基础培养基/mESF添加物
发布时间:2024-02-26 点击数:101
mESF基础培养基/mESF添加物
用于小鼠ES细胞培养的无血清培养基
本产品是用于小鼠ES细胞培养的无血清培养基。只需在基础培养基中添加mESF 添加物和LIF后即可进行小鼠ES细胞培养。使用时无需添加 FBS 或血清代替品,同时无需使用饲养层细胞。
◆产品
● mESF基础培养基(编号No. 136-17805)
● mESF添加物(编号No. 299-73301)
mESF Supplement A 5ml×1
mESF Supplement B 5ml×1(含有 0.0078% 2-mercaptoethanol)
◆特点
● 无需FBS 和血清代替品(无血清培养基)
● 无需饲养层细胞
● 低浓度 LIF 下也能维持未分化能力
◆使用方法
● 往 mESF 基础培养基全量加入各种 mESF Supplement及LIF。
※注 直接将mESF 从现在使用中的培养基移出时,成功移植细胞数量有可能性减少。因此,请播种比移植时更多的细胞。此外,若不擅长直接移植,请按照以下顺序进行驯化。
①播种细胞时,将使用中的培养基与mESF 培养基以1:1的比例混合。
②在后面的移植阶段,将使用中的培养基与mESF 培养基以1:3、 1:7的比例混合,依次增加mESF培养基的用量。
◆小鼠ES细胞D3细胞系的培养
使用本产品培养小鼠 ES细胞 D3细胞系传代至第5代,观察到细胞形态、细胞繁殖能力、未分化标记物。
◆细胞形态
观察到具有小鼠 ES细胞特有光泽的细胞集落。
◆细胞繁殖曲线
使用本产品后的繁殖曲线如下图。
(培养基组成)
mESF 基础培养基 + 各 mESF Supplement + 1,000units/ml StemSure® LIF
(细胞播种数)
7,000 cells/well
(使用骨胶原蛋白涂层处理12孔板)
◆观察到未分化标记物
各种未分化标记物(Nanog, Sox2, Oct3/4, SSEA-1)呈阳性。
◆低浓度LIF下的小鼠ES细胞D3细胞系培养
在低浓度LIF下(250, 500units/ml)培养了小鼠ES细胞D3细胞系。
◆集落形态(ALP染色)?细胞繁殖曲线
细胞形态及细胞繁殖曲线如下图。
(培养基组成)
mESF基础培养基 + 各mESF Supplement + 250 or 500 or 1,000units/ml StemSure® LIF
(细胞播种数)
7,000cells/well
(使用骨胶原蛋白涂层处理12孔板)
◆ALP染色阳性集落形成率
任何LIF浓度下的集落ALP染色几乎都呈阳性。
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 |
136-17805 | mESF Basal Medium | 500ml |
299-73301 | mESF Supplement Set(×100) | 1set |
199-16051 | StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution | 106units |
195-16053 | StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution | 106units×10 |
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