Lysyl Endopeptidase(R) 重组，生物医药分析用（rLys-C）
发布时间：2023-12-25 点击数：114
Lysyl Endopeptidase® 重组，生物医药分析用（rLys-C）Lysyl Endopeptidase®是一种可高度特异性切割赖氨酸羧基侧肽键的丝氨酸蛋白酶，利用本产品出色的特异性，可应用于蛋白一级结构分析的肽链断裂和肽图分析等方面的研究。
本产品是在大肠杆菌中表达的Lysyl Endopeptidase® 的重组体。作为生物医药分析用产品，已对残留DNA、宿主来源蛋白（HCP）、内毒素进行了检测。
◆特点
● 大肠杆菌（E.coli）表达重组体
● 已对残留DNA、HCP、内毒素进行了检测
● 高特异性
◆产品规格
检测项目 | 规格数值 |
外观 | 冻干产品 |
内毒素测试 | 低于20 EU/mg |
残留DNA测试（qPCR） | 10 ng/mg以下 |
HCP检测 | 1 µg/mg以下 |
电泳测试（SDS-PAGE） | 合格 |
活性 | 2.0 AU/mg以上 |
◆牛血清白蛋白（BSA）消化测试
向BSA中分别添加各种酶，反应1~18 h后，分析多肽的数量以及非特异性切割率。
本产品 | 其他公司产品 | |
特异性（反应1 h后的非特异性切割率） | 0% | 0% |
特异性（反应18 h后的非特异性切割率） | 10% | 20% |
活性（反应18 h后的多肽数量） | 41 | 35 |
结果显示，在消化BSA方面本产品与其他公司产品相比，活性更高，即使长时间反应也可以维持高特异性。
◆实验方案
1．制备样品
1） 将蛋白样品溶解于25 mmol/L Tris-HCl，1 mmol/L EDTA，pH 8.5~9.0的溶液中。
2） 向样品溶液中添加DTT或巯基乙醇至终浓度为5 mmol/L。
3） 室温下静置30 min
4） 添加碘乙酰胺至终浓度为10 mmol/L。
5） 室温下避光静置30 min。
2．rLys-C准备
1） 使用12.5 mmol/L Tris-HCl 、pH 8.5~9.5 的溶液100 µL溶解rLys-C粉末。
3．样品的酶消化
1） 根据酶活将制备好的rLys-C添加至样品溶液中：按照蛋白质量比为1 : 20~1 : 100添加，在35~37°C下反应2~18 h。
2） 加入终浓度为0.5~1.0v/v%的三氟乙酸停止反应。。
◆产品列表
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
124-06871 | Lysyl Endopeptidase®, recombinant, Biopharmaceutical Analysis Grade (rLys-C) Lysyl Endopeptidase® 重组体，生物医药分析用（rLys-C） | 20 μg |
◆相关产品
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
125-05061 | Lysyl Endopeptidase, MS Grade 赖氨酰肽链内切酶，MS级 | 20 μg×5 |
121-05063 | 20 μg |