Lysyl Endopeptidase(R) 重组,生物医药分析用(rLys-C)
发布时间:2023-12-25 点击数:106
Lysyl Endopeptidase® 重组,生物医药分析用(rLys-C)
Lysyl Endopeptidase®是一种可高度特异性切割赖氨酸羧基侧肽键的丝氨酸蛋白酶,利用本产品出色的特异性,可应用于蛋白一级结构分析的肽链断裂和肽图分析等方面的研究。
本产品是在大肠杆菌中表达的Lysyl Endopeptidase® 的重组体。作为生物医药分析用产品,已对残留DNA、宿主来源蛋白(HCP)、内毒素进行了检测。
◆特点
● 大肠杆菌(E.coli)表达重组体
● 已对残留DNA、HCP、内毒素进行了检测
● 高特异性
◆产品规格
检测项目 | 规格数值 |
外观 | 冻干产品 |
内毒素测试 | 低于20 EU/mg |
残留DNA测试(qPCR) | 10 ng/mg以下 |
HCP检测 | 1 µg/mg以下 |
电泳测试(SDS-PAGE) | 合格 |
活性 | 2.0 AU/mg以上 |
◆牛血清白蛋白(BSA)消化测试
向BSA中分别添加各种酶,反应1~18 h后,分析多肽的数量以及非特异性切割率。
本产品 | 其他公司产品 | |
特异性(反应1 h后的非特异性切割率) | 0% | 0% |
特异性(反应18 h后的非特异性切割率) | 10% | 20% |
活性(反应18 h后的多肽数量) | 41 | 35 |
结果显示,在消化BSA方面本产品与其他公司产品相比,活性更高,即使长时间反应也可以维持高特异性。
◆实验方案
1.制备样品
1) 将蛋白样品溶解于25 mmol/L Tris-HCl,1 mmol/L EDTA,pH 8.5~9.0的溶液中。
2) 向样品溶液中添加DTT或巯基乙醇至终浓度为5 mmol/L。
3) 室温下静置30 min
4) 添加碘乙酰胺至终浓度为10 mmol/L。
5) 室温下避光静置30 min。
2.rLys-C准备
1) 使用12.5 mmol/L Tris-HCl 、pH 8.5~9.5 的溶液100 µL溶解rLys-C粉末。
3.样品的酶消化
1) 根据酶活将制备好的rLys-C添加至样品溶液中:按照蛋白质量比为1 : 20~1 : 100添加,在35~37°C下反应2~18 h。
2) 加入终浓度为0.5~1.0v/v%的三氟乙酸停止反应。。
◆产品列表
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
124-06871 | Lysyl Endopeptidase®, recombinant, Biopharmaceutical Analysis Grade (rLys-C) Lysyl Endopeptidase® 重组体,生物医药分析用(rLys-C) | 20 μg |
◆相关产品
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
125-05061 | Lysyl Endopeptidase, MS Grade 赖氨酰肽链内切酶,MS级 | 20 μg×5 |
121-05063 | 20 μg |