让IPSCs也疯狂的鸡尾酒CEPT Cocktail
发布时间：2023-09-20 点击数：117
CEPT是美国国立卫生研究院（NIH）开发的小分子混合物。由4种成分组成，并取其组成成分（Chroman 1、Emricasan、Polyamines、Trans-ISRIB）的开头字母命名为“CEPT”。
研究表明，CEPT可防止人ES/iPS细胞（人多能干细胞；hPSCs）在细胞传代中的细胞应激和DNA损伤。与强效ROCK抑制剂Y-27632相似，可提高细胞传代和冻存时hPSCs的存活率。
此外，与基于hPSCs的胚状体和类器官形成、单细胞克隆和基因编辑等干细胞研究中所用的现有培养方法相比，CEPT还可改善细胞存活率。
FUJIFILMWako已上线经无菌测试且无需制备的即用型CEPT Cocktail溶液。本产品为经过滤器灭菌的溶液，可直接添加至培养基使用。有助于再生医疗研究。
◆ 特点
- 从DNA损伤等细胞应激中保护ES/iPS细胞，维持细胞结构与功能
- 已进行过滤灭菌的即用型混合溶液
- 已通过内毒素测试以及支原体阴性检测的CultureSure系列
◆ 测试项目
- 浓度（HPLC）：已通过测试
- 外观：液体
- 内毒素：<3EU/mL
- 已完成无菌测试
- 已完成支原体阴性测试
◆ 使用方法
以1/1,000的量添加本品至培养基，充分混合后使用。
※使用注意
- 本产品为冻存品（-20°C）。为避免反复冻融，建议根据使用量分装冻存。
- 溶解时可能会出现沉淀，并非产品质量问题，请直接使用。
（沉淀于37°C下静置1~2 h可能会溶解，请避免反复冷冻和加热。）
◆ 适用范围
样品：人ES/iPS细胞
应用：
应用：
◆ 性能数据
添加CEPT或Y-27632至含bFGF的StemSure®hPSCΔ培养基，在37°C，5% CO2的条件下培养人iPS细胞201B7株（6孔板 1 well=9.5cm2）。
培养经过16 h以后，更换不含CEPT或Y-27632的培养基，每2-3天更换培养基，继续培养。
培养第8天时，确认细胞后，使用4%多聚甲醛固定细胞，ALP染色后，计数细胞集落。
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单细胞克隆测试
添加CEPT或Y-27632至含bFGF的StemSure®hPSCΔ培养基，在37°C，5% CO2的条件下培养人iPS细胞201B7株（96孔板）。
培养经过16 h以后，更换不含CEPT或Y-27632的培养基，每2~3天更换培养基，继续培养。
培养第13天时，确认细胞后，使用4%多聚甲醛固定细胞，ALP染色后，计数形成细胞集落的孔数与空孔数。
通过所有孔数与细胞集落形成孔数之比，计算细胞集落形成率。
【结果】
细胞接种数少时，添加CEPT的组比添加Y-27632的组形成的细胞集落更多。
未分化人iPS细胞的维持确认
【细胞株】人iPS细胞201B7株
【培养基】StemSure®hPSC培养基Δ+35ng/mL bFGF
Red: rBC2LCN-635（人iPS细胞膜染色）
Blue:DAPI (细胞核染色)
※BC2LCN是一种对存在与人ES/iPS细胞的膜表面的糖链具有高亲和性的重组凝集素
添加CEPT时  | 添加Y-27632时  |
【结果】
添加CEPT时与添加Y-27632时都未观察到细胞形态的差异，均可确认未分化维持状态。
◆ 产品列表
产品编号 | 产品名称 | 产品等级 | 产品规格 |
033-26071 | CultureSure™ CEPT Cocktail(1,000×) CultureSure™ CEPT混合物（1,000×） | 细胞培养用 | 300 μL |
相关产品
产品编号 | 产品名称 | 产品等级 | 产品规格 |
197-17571 | StemSure®hPSC Medium Δ StemSure®人多能干细胞培养基 | 细胞培养用 | 100 mL |
193-17573 | 100 mL×4 | ||
062-06661 | bFGF Solution, MF 成纤维细胞生长因子溶液（碱性） | 细胞培养用 | 50 μL |
068-06663 | 50 μL×4 | ||
195-16031 | StemSure®Freezing Medium StemSure®细胞冻存液 | 细胞培养用 | 100 mL |
192-19081 | StemSure®hPSC Remover (rBC2LCN-PE38 ) StemSure®hPSC未分化干细胞清除剂 | 细胞培养用 | 100 μL |
035-24593 | CultureSure®10mmol/L Y-27632 Solution, Animal-derived-free CultureSure®10mmol/l Y-27632 溶液，无动物源 | 细胞培养用 | 1 mL |
300 μL | |||
Y-27632, MF 选择性强效ROCK抑制剂 | 细胞培养用 | 5 mg | |
25 mg | |||
CultureSure®Y-27632 CultureSure®Y-27632（选择性ROCK抑制剂） | 细胞培养用 | 1 mg | |
5 mg | |||
25 mg | |||
100 mg |