生物制药残留DNA提取试剂盒（碘化钠法 292-81101）
发布时间：2020-05-27 点击数：1169
包含疫苗在内的大部分生物药都是使用培养细胞或大肠杆菌生产的，有研究者指出，通过这种方式生产的原料药、制剂可能会残留着宿主细胞来源的DNA。不可否认，宿主细胞或病毒来源的致癌基因很可能会通过这些残留DNA转运过来，或引起病毒DNA感染事件。因此，残留DNA的定量检测是生物制药和其工艺验证中不可或缺的一部分。
有报告建议生物药中每剂量残留DNA的含量不超过100 pg，不仅是欧美地区，其他国家也愈发认为必须将定量检测宿主细胞来源的残留DNA作为质量检测项目之一。而检测这种痕量残留DNA，则需要从样品中以高回收率提取痕量残留DNA。
生物制药残留DNA提取试剂盒（碘化钠法）
残留DNA提取试剂盒遵照中国药典记载的碘化钠法，适用于疫苗和治疗用生物制品所含宿主细胞残余DNA的提取。
残留DNA提取试剂盒可以提取样品中含有的极微量的DNA，回收率较高。DNA的提取操作时间为60-90 分钟。提取的DNA可以通过qPCR进行定量。西宝生物科技（上海）股份有限公司是Wako的授权一级代理，如您对产品感兴趣，咨询订购热线：400-021-8158
◆ 原理
1. 试剂盒中包含碘化钠和表面活性剂N-月桂基肌氨酸钠。碘化钠作为蛋白质增溶剂，与表面活性剂一同将样品中以蛋白质为主的成分转变为可溶状态。
2. 通过加入异丙醇，能够选择性地令核酸（主要是DNA）和糖原产生沉淀（即共沉淀）。
本试剂盒实现了在不使用固相载体或有机溶剂的情况下，通过简便的提纯步骤获得了沉淀物，以高回收率提取痕量DNA。
◆ 特点
● 遵照中国药典登载的碘化钠法*
● 高回收率
● 单管操作（无需换管） ，耗时仅60-90 min
● 不需要苯酚和氯仿等有机溶剂
● 兼容多种DNA
● 高回收率
● 单管操作（无需换管） ，耗时仅60-90 min
● 不需要苯酚和氯仿等有机溶剂
● 兼容多种DNA
* 为使DNA检测方法与国际标准保持同步，中国药典（The Chinese Pharmacopoeia）宣布建立残留细胞DNA检测国家标准。碘化钠法将作为残留DNA提取方法，被新增至2020版的中国药典中。
◆ 试剂盒构成
产品编号 | 内容物 | 内容量 |
299-81111 | 碘化钠溶液, CP | 26 mL |
296-81121 | N-月桂酰肌氨酸钠溶液, CP | 1.2 mL |
293-81131 | 洗净液A, CP | 42 mL |
290-81141 | 洗净液B, CP | 40 mL×2 |
297-81151 | 糖原溶液, CP | 0.1 mL |
备注：每种成分不单独出售
◆ 使用方法
过程1
过程2
◆ 应用案例
DNA spiking test（加标回收实验）
gDNA | E.Coli | |
Spike (fg) | Detection (fg) | Recovery (%) |
1,000 | 939 | 94 |
10,000 | 11,004 | 110 |
100,000 | 100,009 | 100 |
1,000,000 | 969,911 | 97 |
gDNA | CHO | |
Spike (fg) | Detection (fg) | Recovery (%) |
100 | 100 | 100 |
1,000 | 979 | 98 |
10,000 | 10,831 | 108 |
100,000 | 90,031 | 90 |
1,000,000 | 1,045,186 | 105 |
gDNA | Pichia pastoris GS115 | |
| Spike (fg) | Detection (fg) | Recovery (%) |
| 10,000 | 10,316 | 103 |
| 100,000 | 94,045 | 94 |
| 1,000,000 | 1,031,630 | 103 |
DNA Extractor™ Kit(292-81101)可以高产量提取残留DNA，甚至少量残留DNA。
◆ 产品信息
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
292-81101 | DNA Extractor™ Kit for Residual DNA, CP Method(Sodium Iodide Method) 残留DNA提取试剂盒（碘化钠法） | 50 tests |
◆ 配套qPCR试剂
根据2020版《中国药典》“外源性DNA残留检测第三法（qPCR）”，可选用以下试剂进行下游定量
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
317-08821 | GeneAce Probe qPCR Mix II | 50 reactions |
313-08823 | 200 reactions |
含化学修饰的热启动酶及参比染料，适用于Taqman探针法。
◆ Seebio 品牌
含化学修饰的热启动酶及参比染料，适用于Taqman探针法。
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
Seebio® 热启动Taq酶探针法qPCR预混液(2X) | 2×500uL |
◆ 其它相关宿主残留检测试剂盒
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
ADI-900-057 | Protein A ELISA kit 蛋白A ELISA试剂盒 | 96 wells |
ENZ-KIT127-0001 | E. coli host cell protein ELISA kit | 96 wells |
ENZ-KIT128-0001 | CHO host cell protein ELISA kit CHO宿主细胞蛋白ELISA试剂盒 | 96 wells |
ENZ-KIT162-0001 | HEK293T宿主细胞蛋白ELISA试剂盒 | 96 wells |
◆ 扩展阅读
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