Wako即用型脑组织冻存液(029-19161) 保留更多活细胞

Brain Tissue Freezing Medium
Wako即用型脑组织冻存液 (029-19161)

		总细胞数（cells/vial）	活细胞数（cells/vial）	活细胞比例（%）	活细胞数比（假设未 经过冻存的活细胞数为1）
①	未经冻保	1.74×106	1.65×106	95	1
②	脑组织冻存液（本品）	1.21×106	1.11×106	92	0.67
③	Wako冻存液 （通用动物细胞用） （含有血清成分）	8.34×105	7.29×105	87	0.44
④	其他公司的冻存液 （通用动物细胞用） （含有血清成分）	3.40×105	2.91×105	86	0.18

请尽量缩短从开始解剖到一次冷冻开始的时间。（请以从进行动物麻醉到将脑组织放入冷冻保存溶液中的时间控制在1小时之内为标准。）从胚胎中取出的细胞存活率随时间的推移而下降。使用神经细胞分散液能去除死亡细胞，减少得到的细胞总数。冰上操作。

1.　麻醉小鼠或大鼠。
2.　用70%乙醇对麻醉动物进行全身（包括胡须和尾巴）消毒。
3.　用不锈钢盘将动物送入铺好无尘纸的清洁区。
4.　从妊娠动物中取出胚胎，放入含有L-15溶液的培养皿中。预先将培养皿与L-15溶液的温度调节到4℃。将盛放胚胎的培养皿放置于冰块上。
※L-15溶液：含有终浓度为0.05 mg/mL硫酸庆大 霉素的Leibovitz's L-15培养基
5.　将胚胎转移到培养皿的盖子上，并使用显微镜快速移除脑组织。
6.　解剖后的脑组织放入另一个装有L-15溶液的培养皿，再将培养皿放置到冰块上。

1.　将从冰箱中取出本品和冷冻用碎冰盒放到清洁区附近。
2.　用镊子把冷冻的脑组织放入本品中，盖好试管盖（放入脑组织前要混合保存溶液）。
3.　将试管埋入冷冻用碎冰盒中，试管与冰块要紧密接触（试管要埋入试管盖刚好露出冰面的位置）。
4.　盖上泡沫箱，静置90分钟。

1.　一次冷冻后，将装有组织的试管转移到冻存管，然后立刻放入超低温冰箱（-80℃）。
（冻存管要直接放置到冰箱内的底面。）
※为了将装有组织的试管的温度变化控制在范围内，操作时动作要快速。
※进行这一步操作时，需注意样品管盖切勿与保存溶液相接触。
2.　在超低温冰箱（-80℃）中静置3小时。（静置时间可延长30分钟左右。但不能少于3小时。）
 ※期间避免反复开关冰箱门。

1.　二次冷冻后，将装有组织的样品管置于冻存架上，然后立刻放入液氮罐中。
※进行这一步操作时，需注意样品管盖切勿与管内的保存溶液相接触。

产品编号	产品名称	规格	包装
029-19161	Brain Tissue Freezing Medium 脑组织冻存液	细胞培养用	1 mL×10

产品编号	产品名称	规格	包装
148-09671	Neuron Culture Medium  神经细胞用培养基	用于细胞培养	100mL

产品编号	产品名称	规格	包装
神经细胞分散液
291-78001	Neuron Dissociation Solutions 神经细胞用分散液	用于细胞培养	4次份/箱
297-78101	Neuron Dissociation Solutions S 神经细胞用分散液	用于细胞培养	10次份/箱
已知组成培养基/补充剂
148-09615	NS Basal Medium NS基础培养基	用于细胞培养	500 mL
146-09351	NS Supplement(×50) NS 补充剂(×50)	用于细胞培养	10 mL
149-09721	NS Supplement without Insulin(×50) NS 添加剂（不含胰岛素）（×50）	用于细胞培养	10 mL
145-09723			50 mL
142-09691	NS Supplement without Vitamin A(×50) NS 添加剂（不含维生素A）（×50）	用于细胞培养	10 mL
141-09041	N2 Supplement with Transferrin(Apo)(×100) N2神经细胞生长添加剂含转铁蛋白（Apo）（×100）	用于细胞培养	5 mL
141-08941	N2 Supplement with Transferrin(Holo)(×100) N2神经细胞生长添加剂含转铁蛋白（Holo）（×100）	用于细胞培养	5 mL
073-05391	200 mmol/L L-Glutamine Solution (×100) 200 mmol/L 谷氨酸溶液（×100）	用于细胞培养	100 mL

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