【产品】链霉亲和素(Streptavidin,SA)

链霉亲和素 (Streptavidin，简称SA)具有与生物素特异结合的能力，并能与HRP、AP、磁珠等结合，且等电点比亲和素低，不含糖链，因而参与免疫学中的检测信号放大，广泛应用于ELISA、IHC、WB等实验及亲和色谱填料的制备、生物传感器、生物芯片的制作。西宝生物可提供链霉亲和素(Streptavidin，简称SA)，灵敏度高、特异性好、结合能力强且稳定，咨询热线400-021-8158！

1 概述：

【名称】链霉亲和素 (streptavidin，SA)
【货号】ECL0006G
【分子量】60 kDa
【来源】大肠杆菌重组表达
【保存条件】-20℃保存
【有效期限】2 年
链霉亲和素 (Streptavidin，简称SA)，是链霉菌在培养过程中分泌的一种蛋白质产物。具有与生物素特异结合的能力，结合常数高达1015M。同时，由于链霉亲和素等电点比亲和素低，且不含糖基链，故在检测中的灵敏度和特异性都高于亲和素，建立在此基础上的生物素-链霉亲和素系统的应用比生物素-亲和素系统有更大优势。

2 结构：

链霉亲和素是四聚体蛋白，大小为66KDa。一分子链霉亲和素可以高度特异性地与四分子生物素结合，两者之间的亲和力强烈，链霉亲和素-生物素复合物的解离常数处于10 mol/L数量级，这一性质常用于分子生物学用途。其中一条SA肽链中有159个氨基酸残基，分子量为16450。

3 质量指标：

Purity(SDS-PAGE)	≥95%
Purity(HPLC)	≥95%
Solubility	Colorless transparent liquid
pH	6.6~7.4
Identification	Positive
Appearance	White lyophilized powder, no visual foreign matters

4 用途：

链霉亲和素可偶联HRP、AP、生物素及磁珠等，参与免疫学中检测信号的放大，广泛应用于ELISA、IHC、WB等实验及亲和色谱填料的制备、生物传感器、生物芯片的制作。

酶偶联物标记的链霉亲和素

辣根过氧化物酶标记的链和亲霉素
1) 由高纯度的链霉亲和素和辣根过氧化物酶，通过特殊的偶联技术生产；
2) 保持了过氧化物酶的高比活性。
应用于：免疫组化（IHC）、免疫细胞化学（ICC）、原位杂交（ISH）等领域。

碱性磷酸酶标记链霉亲和素
1) 适合于固相分析，组织/细胞染色系统和印迹应用，选择特定的共价连接；
2) 缀合物稳定并高活性。
应用于：免疫组化（IHC）、免疫细胞化学（ICC）、酶联免疫斑点法（ELISPOT）、酶联免疫吸附法（ELISA）、原位杂交（ISH）及印迹应用。

荧光基团标记的链霉亲和素

荧光素标记链霉亲和素
1) 在免疫荧光、原位杂交或流式细胞术等应用中可用于检测生物素化的二抗和其他大分子；
2) 高度纯化并具低的非特异性结合特性；
3) 对生物素具有较高的亲和力；
应用于：免疫荧光（IF）、原位杂交（ISH）、流式细胞术（Flow Cyt）。

链霉亲和素酶标板

将链霉亲和素直接或间接预包被在酶标板上，稳定性高，易于保存，使用时只要加入生物素化的抗体或者抗原即可。

5 应用领域：

6 注意事项：

1、冻干粉溶解后应避免反复冻融，建议分装成小包装后分别冻存;
2、溶解后立即使用效果好，不能4°C长期存放;

7 实验举例&操作步骤：

一、在ELISA实验中用于包被和信号放大
1、用碳酸钠缓冲溶液（pH 9.6）溶解冻干粉，将浓度稀释成3-10ug/ml（客户可设定梯度进行实验）
注意：由于SA等电点是7.4，包被不建议使用中性缓冲液
2、用移液器吸取100ul/孔，4℃过夜包被或者37℃包被2h；
3、洗涤：倒尽板孔中液体，加200ul洗涤液，静放三分钟，反复三次，后将反应板倒置在吸水纸上，使孔中洗涤液流尽，扣干
4、后续进入封闭、洗涤、抗原抗体结合流程
若不立即进入下游实验，包被板需要进行烘干保存时。包被前，将包被液中加入20%蔗糖作为活性保护剂。

二、SA偶联磁珠用于化学发光反应
2.1 NHS 活化
1、充分混匀磁珠后，取100μl 羧基磁珠到1.5 ml 离心管中，置于磁性分离上，待固液分离后去除上清液；
2、取200μl MES溶液（25mM，pH 5.0）加入到离心管中，置于磁性分离上，待固液分离后去除上清液。重复该步骤1 次；
3、迅速加入新配制的50μlEDC溶液和50μl NHS 溶液（均为50mg/ml，以上述MES配制）到装有磁珠的离心管中，漩涡混匀使磁珠充分悬浮，室温下垂直混合30min；
4、反应结束后，加入100μl 上述 MES 溶液洗涤 2 次；（活化状态不宜长时间保存，建议立即进行偶联）

2.2 蛋白偶联
1、将离心管置于磁性上，分离去除上清液，加入100μl蛋白溶液（25 mM MES，pH 5.0）
轻柔地混匀；（蛋白浓度在0.1-2.0mg/ml）
2、在室温下垂直混合反应2h，或在4℃条件下垂直混合过夜；
3、反应结束后将离心管置于磁分离架上，磁性分离去除上清液，加入1ml乙醇胺溶液（3M，pH9.0）洗涤磁珠 2 次；
4、加1ml乙醇胺溶液（3M, pH 9.0）于离心管中，涡旋30s，将离心管置于垂直混合仪中室温反应1-2h；
5、反应结束后，将离心管置于磁力架上，待固液分离后移除上清液，然后加入100μl纯化水轻柔涡旋 30s，磁吸分离，重复该步骤 1 次；
6、加入适量的保存液保存于4°，如果固定的生物配体稳定，可以在保存溶液中加入0.02%（W/V）叠氮化钠作为抑菌剂。

8 相关产品列表：

货号	中文品名	英文品名	规格
164043	辣根过氧化物酶	Peroxidase(HRP)	100mg,1g
165801	碱性磷酸酶	Phosphatase, Alkaline	10mg,100mg
180101	3,3'5,5'-四甲基联苯胺盐酸盐	TMB-2HCl	1g,5g,25g
160781	4-硝基苯基磷酸二钠盐,六水	PNPP-2Na	1g,5g,25g
188230	重组蛋白A	Recombinant Protein A	1mg/10mg/100mg
188241	重组蛋白G	Recombinant Protein G	1mg/10mg/100mg
188250	重组蛋白A/G	Recombinant Protein A/G	5mg
188261	重组蛋白L	Recombinant Protein L	1mg/10mg

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