化学发光用酶和底物原料产品推荐

化学发光免疫分析（Chemiluminescence Immunoassay，CLIA）是将化学发光反应与抗原-抗体特异性免疫反应相结合的一种分析技术，发光标记物参与免疫结合后，经化学反应释放化学能，激发分子产生光子，最后检测光信号强度，即可换算出待测物浓度。

凭借其灵敏度高、特异性强、线性范围宽、易于自动化等优势，化学发光技术在临床免疫诊断中已成为重要的平台；在免疫诊断领域中，化学发光已占据约70%以上的市场份额，在心肌标志物、肿瘤标志物、甲状腺功能、激素检测等核心应用场景中实现了全面的覆盖。

根据发光体系的不同，化学发光技术可分为酶促化学发光、直接化学发光、电化发光和光激化学发光四大类种，其中以酶促化学发光和直接化学发光最为普遍，应用广泛。

酶促化学发光主要包括辣根过氧化物酶（HRP）和碱性磷酸酶（ALP）两大类酶催化反应体系；利用HRP或ALP作为标记酶，通过酶催化相应底物发生化学反应产生光信号，实现最终的检测。

碱性条件下，HRP催化过氧化氢氧化鲁米诺或其衍生物，生成激发态的3-氨基邻苯二甲酸，该中间体在返回基态时释放光子，最大发射波长约425 nm。通过HRP反应体系中添加化学增强剂（如对碘苯酚、对苯基苯酚等），可使发光强度提升数百倍。

鲁米诺底物体系是闪辉型发光，这类底物体系成熟、成本经济，是应用最广泛的HRP发光底物。

碱性磷酸酶（ALP）催化金刚烷基-1,2-二氧杂环丁烷磷酸酯（AMPPD）水解脱去磷酸基团，生成不稳定的中间体，该中间体在分解过程中释放能量，生成激发态产物，返回基态时发出波长约470 nm的光信号。

 

AMPPD体系为辉光型发光，发光持续时间长，信号稳定，灵敏度高，是超敏检测的代表性体系。

直接化学发光以吖啶酯（Acridinium Ester, AE）类化合物直接标记抗体或抗原，在过氧化氢和碱性条件下直接被氧化生成激发态的N-甲基吖啶酮，在返回基态时发出波长约430 nm的光信号，发光过程无需酶参与催化。

AE发光为闪辉型发光，反应速度快，背景信号低，体系简单，无需额外添加酶和底物。

辣根过氧化物酶（HRP）主要来源于植物辣根，分子量约44 kDa，由无色的酶蛋白和含铁卟啉环的深棕色辅基构成，糖含量约18%。辅基与酶蛋白的吸光比值称为RZ值，反应酶分子的辅基结合饱和度，RZ值越高，表示酶结合辅基比例越高。

HRP具有稳定性好、比活性高、价格经济的特点，是免疫分析中应用最广泛的标记酶，配合鲁米诺类底物可用于化学发光检测，也可配合TMB等底物用于ELISA中的显色检测。

碱性磷酸酶（ALP）是一类非特异性磷酸单酯水解酶，广泛存在于动物和微生物中。免疫检测中用的ALP主要来源于牛小肠或大肠杆菌重组表达；ALP催化效率高，在化学发光体系中与AMPPD底物搭配可实现高灵敏度检测。

ALP为二聚体金属蛋白酶，通常需要锌、镁离子等作为催化辅因子激活。

酶活定义：在37℃、pH 9.5条件下，一个单位的碱性磷酸酶每分钟能够水解对硝基苯酚磷酸盐（pNPP）产生1μmol对硝基苯酚（pNP）。

除酶促化学发光用的酶，西宝生物还可提供直接化学发光中的各类吖啶酯和常用的化学发光底物如鲁米诺、异鲁米诺、AMPPD等。部分产品信息如下，详情请致电西宝生物400-021-8158。