GalNAz“搬运工”来了！Y289L突变半乳糖基转移酶赋能新一代ADC

在抗体药物偶联物（ADC）研发领域，定点偶联技术正成为行业主流趋势。而在这场技术变革中，一位 “搬运工”--重组B4GALT1(Y289L)突变半乳糖基转移酶，正在悄然改变ADC的生产方式，为ADC的定点偶联打开了全新的大门。西宝生物提供β-1,4-半乳糖基转移酶1（Y289L），产品均一性高、稳定性好，详情致电400-021-8158。

重组B4GALT1(Y289L)，即β-1,4-半乳糖基转移酶1的Y289L突变体，来源于牛，采用重组技术表达生产。

在野生型状态下，B4GALT1的主要功能是将半乳糖（Gal）转移到糖蛋白的N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）非还原性末端。然而，通过Y289L单点突变（将289位的酪氨酸Y替换为亮氨酸L），这个酶的底物特异性发生了革命性改变。

突变后的Y289L酶获得了高效识别和转移N-叠氮乙酰半乳糖胺（GalNAz）的能力。野生型酶几乎只添加半乳糖，而突变体能够高效地将GalNAz转移到末端GlcNAc残基上，形成β(1→4)键。

在ADC研发中，药物抗体比（DAR）的均一性直接影响药物的疗效和安全性。传统的赖氨酸或半胱氨酸随机偶联方法往往产生DAR不均一的混合物，影响药代动力学和毒理学特性。

B4GALT1(Y289L)的出现，使得糖基定点偶联技术成为可能。该酶能够将带有叠氮基团的GalNAz精准地转移到抗体Fc段N-糖基化位点的核心GlcNAc上。随后，通过无铜点击化学（SPAAC） ，叠氮基团与带有环辛炔（如DBCO）的毒素分子高效连接，形成均一的ADC偶联物。更重要的是，Fc段的糖基化位点远离抗体的抗原结合域，偶联过程不影响抗体本身的靶向能力。

利用Y289L突变体将带有生物正交化学手柄（如叠氮基团）的非天然糖（如GalNAz），精准地“搬运”到抗体Fc段的特定糖基化位点上。

实现定点、定量偶联：此过程为后续通过点击化学（如无铜点击化学SPAAC）偶联毒素分子提供了精准的“锚点”。这种方法能从分子层面控制药物抗体比（DAR），生产出组成高度均一的ADC，从而优化药物的疗效和安全性。

抗体Fc段的糖基化对其稳定性、免疫效应功能（如ADCC、CDC）等至关重要。Y289L酶是实现抗体糖链精准重塑的关键工具。

· 合成均一糖型：通过将抗体上复杂的天然糖链转化为结构均一的G0糖型，再利用Y289L酶添加带有修饰基团的糖，可以系统地研究特定糖链结构对抗体功能的影响。

· 构建非天然糖型：一篇2026年的研究显示，科学家已利用Y289L突变体成功合成了带有LacdiNAc（GalNAcβ1-4GlcNAc）这种非天然糖型的抗体。研究还发现，这种新型糖型同样能有效结合FcγIIIA受体和C1q蛋白，为开发具有特殊功能的抗体提供了新思路。

除了抗体，Y289L酶在基础研究中也扮演重要角色，特别是用于研究O-GlcNAc糖基化这种重要的蛋白质翻译后修饰。

· 全局性标记：该酶可以将带有叠氮基团的GalNAz高效地转移到蛋白质的O-GlcNAc修饰位点上。

· 下游分析：通过这个“标签”，研究人员可以利用点击化学连接各种探针（如生物素或荧光素），实现对O-GlcNAc修饰蛋白的特异性富集、鉴定和动态变化分析。

更多产品请访问我们的网站www.seebio.cn，或致电400-021-8158.