甲胎蛋白（AFP）-磁微粒化学发光法（AE/AP） /荧光免疫层析解决方案
发布时间：2026-06-29 点击数：1
1.项目背景
1.1项目简介及临床意义
甲胎蛋白（Alpha-Fetoprotein，AFP）是一种胚胎源性糖蛋白，主要在胎儿发育早期由肝脏和卵黄囊大量合成。随着胎儿出生，AFP的基因表达受到严格抑制，其血清浓度迅速下降至极低水平。在正常成年人体内，AFP含量微乎其微，因此血清AFP出现异常升高时，通常提示肝细胞处于异常增殖状态或存在恶变风险。当肝细胞发生癌变时，AFP由肝癌细胞再次分泌产生，当血清中AFP含量＞400ng/mL时，诊断原发性肝癌的阳性率可达60%-80%，因此AFP测定是诊断原发性肝癌的一个特异性指标，还可以用于肝癌的治疗效果及预后评估。当AFP＞500ng/mL时，患者的存活期缩短，如果手术治疗后AFP一周内降至正常，提示预后良好，如果下降后又升高，则有可能是肝癌复发。当然AFP不升高也不能排除肝癌，要结合其他检查如影像学检查以及临床症状进行综合判断。
除肝癌以外，酒精性肝炎、肝硬化、病毒性肝炎等一些造成肝脏损伤的疾病也会造成AFP升高，但一般会在400ng/mL以下。这些疾病人群属于肝癌高危人群，应该定期进行AFP筛查。怀孕时AFP也会升高，分娩后3周左右恢复正常。部分生殖系统的肿瘤也会引起AFP升高。
WS/T 645.2-2026《临床常用免疫学检验项目参考区间第2部分：血清甲胎蛋白、癌胚抗原、糖链抗原19-9、糖链抗原15-3、糖链抗原125》指出中国18岁～79岁成人血清甲胎蛋白的参考区间≤7ng/mL。
1.2已上市产品性能指标
序号 | 公司 | 检测平台 | 样品类型 | 检测范围 | 检出限 | HOOK浓度 |
1 | 罗氏诊断 | 电化学发光 | 血液 | 0.605-1210ng/mL | 0.605ng/mL | 1210000ng/mL |
2 | 西门子诊断 | 磁微粒化学发光 | 血液 | 1.3-1000ng/mL | 1.3ng/mL | 460000ng/mL |
3 | 贝克曼诊断 | 磁微粒化学发光 | 血液 | 0.5-3000ng/mL | 0.5ng/mL | 500000ng/mL |
2.性能表现
针对甲胎蛋白（AFP）项目的检测，西宝生物推出2株AFP单抗及1款AFP抗原。
具体性能如下（以下评估仅代表在西宝生物的工艺体系下的验证，建议客户根据自身工艺进行更为详细的验证）。
2.1化学发光（AE）平台
组合1：甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）包被羧基磁珠+甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）标记吖啶酯；
组合2：甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）标记生物素+甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）标记吖啶酯+链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）；
线性范围：0.5ng/mL-1210ng/mL；最低检出限：0.5ng/mL。HOOK：1210000ng/mL。
2.2化学发光（AP）平台
组合3：甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）包被羧基磁珠+甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）标记碱性磷酸酶；
组合4：甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）标记生物素+甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）标记碱性磷酸酶+链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）；
线性范围：0.5ng/mL-1210ng/mL；最低检出限：0.5ng/mL。HOOK：1210000ng/mL。
2.3荧光免疫层析平台
组合5：甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）标记荧光微球+甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）划膜；
线性范围：2ng/mL-500ng/mL；最低检出限：2ng/mL。HOOK：1210000ng/mL。
2.4各组分稳定性评估
2.4.1采用AFP磁珠标记物稀释液（货号：DCD0567A）将磁珠包被的AFP抗体浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；
2.4.2采用AFP吖啶酯标记物稀释液（货号：DCD0566B）将吖啶酯标记的AFP抗体浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；
2.4.3采用AFP AP酶标记物稀释液（货号：DCD0535A）将碱性磷酸酶标记的AFP抗体浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；
2.4.4采用链霉亲和素（SA）稀释液（货号：DCD0566B）将SA磁珠浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；
2.4.5采用AFP生物素标记物稀释液（货号：DCD0566B）将生物素标记的AFP抗体浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；
2.4.6采用AFP抗原稀释液（货号：DCD0566E）将AFP抗原配制成梯度进行37℃热稳定性实验；
如表1所示：
a.磁珠包被AFP抗体工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明磁珠包被AFP抗体工作液热稳定性良好；
b.吖啶酯标记AFP抗体工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明吖啶酯标记AFP抗体工作液热稳定性良好；
c.碱性磷酸酶标记AFP抗体工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明碱性磷酸酶标记AFP抗体工作液热稳定性良好；
d.SA磁珠单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明SA磁珠的热稳定性良好。
e.AFP生物素单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明AFP生物素热稳定性良好。
f.AFP抗原梯度（液体型）单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%左右，表明AFP抗原（液体型）梯度热稳定性良好。
表1 AFP抗原各组分工作液及标准品热稳定性7天数据
序号 | AFP抗原稀释浓度 （ng/mL） | 磁珠-包被AFP抗体工作液37℃热加速7天变化 | 吖啶酯-标记AFP工作液37℃热加速7天变化 | AP酶-标记AFP工作液37℃热加速7天变化 | SA磁珠工作液37℃热加速7天变化 | 生物素标记AFP抗体工作液37℃热加速7天变化 | AFP抗原梯度 （液体型）37℃热加速7天变化 |
S0 | 0 | 3.4% | 2.5% | 3.2% | 2.5% | 2.8% | 5.3% |
S1 | 1 | -2.2% | -1.7% | 7.2% | 2.2% | 1.2% | -7.1% |
S2 | 5 | 3.2% | 7.2% | 4.0% | -2.4% | 2.5% | -7.8% |
S3 | 20 | 4.1% | 6.7% | 9.3% | 3.7% | 9.5% | -5.6% |
S4 | 100 | 4.2% | -3.0% | 7.8% | -0.6% | 5.4% | -8.0% |
S5 | 500 | 5.3% | -1.4% | 4.8% | -2.1% | 10.1% | -6.3% |
S6 | 1500 | 8.4% | -7.0% | 5.7% | -2.0% | 5.4% | -1.5% |
平均变化 （不含S0） | 3.8% | 0.1% | 6.5% | -0.2% | 5.7% | -6.0% | |
3.临床相关性
3.1化学发光（AE）平台：
3.1.1西宝生物发光（AE）平台皮AFP原料配对组合1与罗氏的AFP试剂（电化学发光法）赋值的临床样本相关性R2＞0.95，相关性良好；
3.1.2西宝生物发光（AE）平台皮AFP原料配对组合2与罗氏的AFP试剂（电化学发光法）赋值的临床样本相关性R2＞0.95，相关性良好；
3.2化学发光（AP）平台：
3.2.1西宝生物发光（AP）平台皮AFP原料配对组合3与罗氏的AFP试剂（电化学发光法）赋值的临床样本相关性R2＞0.95，相关性良好；
3.2.2西宝生物发光（AP）平台皮AFP原料配对组合4与罗氏的AFP试剂（电化学发光法）赋值的临床样本相关性R2＞0.95，相关性良好；
3.3荧光免疫层析平台：
西宝生物荧光免疫层析平台AFP原料配对组合5与罗氏的AFP试剂（电化学发光法）赋值的临床样本相关性R2＞0.95左右，相关性良好。
4. 测试方案
4.1化学发光（AE）平台
4.1.1 AFP抗体配对组合1（两试剂模式）
待测抗原:AFP抗原（货号：EDD0914B）；
样本:样品加样量10ul；
试剂1：甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）包被-磁珠稀释物，用量50ul/测试；
试剂2：甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）标记-吖啶酯稀释物，用量50ul/测试；
反应条件：
第一步：10ul样本+50ul试剂1，37℃孵育5min，清洗；
第二步：加入50ul 试剂2，37℃孵育5min，清洗；
第三步：加入预激发液及激发液，进行测试。
4.1.2 AFP抗体配对组合2（三试剂模式）
待测抗原AFP抗原（货号：EDD0914B）；
样本:样品加样量10ul；
M试剂：链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）稀释物，用量100ul/测试；
试剂1：甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）标记-生物素稀释物，用量100ul/测试；
试剂2：甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）标记-吖啶酯稀释物，用量100ul/测试；
反应条件：
第一步：10ul样本+100ul M试剂+100ul试剂1，37℃孵育5min，清洗；
第二步：加入100ul 试剂2，37℃孵育5min，清洗；
第三步：加入预激发液及激发液，进行测试。
测试使用发光仪器:科斯迈SMART 500S。
4.2化学发光（AP）平台
4.2.1 AFP抗体配对组合3（两试剂模式）
待测抗原:AFP抗原（货号：EDD0914B）；
样本:样品加样量10ul；
试剂1：甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）包被-磁珠稀释物，用量100ul/测试；
试剂2：甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）标记-碱性磷酸酶稀释物，用量100ul/测试；
反应条件：
第一步：10ul样本+100ul试剂1，37℃孵育5min，清洗；
第二步：加入100ul试剂2，37℃孵育5min，清洗；
第三步：加入底物，进行测试。
4.2.2 AFP抗体配对组合4（三试剂模式）
待测抗原:AFP抗原（货号：EDD0914B）；
样本:样品加样量10ul；
M试剂：链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）稀释物，用量100ul/测试；
试剂1：甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）标记-生物素稀释物，用量100ul/测试；
试剂2：甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）标记-碱性磷酸酶稀释物，用量100ul/测试；
反应条件：
第一步：10ul样本+100ul M试剂+100ul试剂1，37℃孵育5min，清洗；
第二步：加入100ul 试剂2，37℃孵育5min，清洗；
第三步：加入底物，进行测试。
测试使用发光仪器:迎凯Shine i2900。
4.3荧光免疫层析平台
AFP抗体配对组合5
待测抗原:AFP抗原（货号：EDD0914B）；
反应条件：10ul样品+800ul稀释液混匀，上样，反应时间（10min-15min）；
测试使用荧光仪器:和迈FIC-S100。
5.产品信息
产品名称 | 货号 | 推荐配对 |
甲胎蛋白（AFP）抗体 | EKY0006A | AFP配对： 甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）包被羧基磁珠+甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）标记吖啶酯；（发光配对组合1） 甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）标记生物素+甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）标记吖啶酯+链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）（发光配对组合2） 甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）包被羧基磁珠+甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）标记碱性磷酸酶；（发光配对组合3） 甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）标记生物素+甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）标记碱性磷酸酶+链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）；（发光配对组合4） 甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）标记荧光微球+甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）划膜；（荧光配对组合5） |
甲胎蛋白（AFP）抗体 | EKY0006B | |
甲胎蛋白抗原（AFP） | EDD0914B | |
甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）包被羧基磁珠浓缩液 | DKY1390A | |
甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）标记生物素浓缩液 | DKY1390B | |
甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）标记吖啶酯浓缩液 | DKY1390C | |
甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）标记碱性磷酸酶浓缩液 | DKY1390D | |
甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）标记荧光微球浓缩液 | DKY1390E | |
化学发光底物AMPPD干粉 | DCD0721B | |
AMPPD 发光底物液（即用型） | DCD0517B | |
APS-5 发光底物液（即用型） | ECD0532M | |
羧基磁性微球，1um | DEG0852A | |
重组碱性磷酸酶（高活性） | DCE0108L | |
链霉亲和素磁性微球，1.5um | DEG0814A | |
时间分辨荧光微球，羧基（300nm） | AEG0789C | |
AFP抗体磁珠标记物稀释液 | DCD0567A | |
AFP抗体抗原稀释液 | DCD0566E | |
AFP抗体生物素标记物稀释液 | DCD0566B | |
AFP抗体吖啶酯标记物稀释液 | DCD0566B | |
AFP抗体AP标记物稀释液 | DCD0535A | |
链霉亲和素（SA）磁珠稀释液 | DCD0566B |