胰岛素（Insulin）-磁微粒化学发光法（AE/AP） /荧光免疫层析解决方案
发布时间：2026-06-12 点击数：1
1.项目背景
1.1项目简介及临床意义
胰岛素（Insulin）是由胰腺胰岛β细胞分泌的唯一降血糖多肽激素，由51个氨基酸组成，分子量约5.8kDa。其前体为胰岛素原，经酶切后生成等量胰岛素与C肽，释放入血发挥生理作用。
胰岛素检测（空腹/餐后/释放试验）是评估胰岛β细胞功能、诊断糖尿病分型、判断胰岛素抵抗及排查低血糖/胰岛素瘤的核心项目，常用化学发光免疫法（CLIA）检测，单位为mIU/L（μU/mL）或pmol/L。
1.2已上市产品性能指标
序号 | 公司 | 检测平台 | 样品类型 | 检测范围 | 检出限 | HOOK浓度 |
1 | 罗氏诊断 | 电化学发光 | 血液 | 0.2-1000μU/mL | 0.2μU/mL | 20000μU/mL |
2 | 西门子诊断 | 磁微粒化学发光 | 血液 | 0.5-300.0mU/L | 0.5mU/L | 3000mU/L |
3 | 雅培诊断 | 磁微粒化学发光 | 血液 | 1-300μU/mL | 1μU/mL | 15000μU/mL |
2. 性能表现
针对胰岛素（Insulin）项目的检测，西宝生物推出2株胰岛素单抗及1款胰岛素抗原。
具体性能如下（以下评估仅代表在西宝生物的工艺体系下的验证，建议客户根据自身工艺进行更为详细的验证）。
2.1化学发光（AE）平台
组合1：胰岛素抗体（货号：EKY0705B）包被羧基磁珠+胰岛素抗体（货号：EKY0705A）标记吖啶酯；
线性范围：0.5μU/mL-300μU/mL；最低检出限：0.5μU/mL。HOOK：20000μU/mL。
2.2化学发光（AP）平台
组合2：胰岛素抗体（货号：EKY0705B）包被羧基磁珠+胰岛素抗体（货号：EKY0705A）标记碱性磷酸酶；
线性范围：0.5μU/mL-300μU/mL；最低检出限：0.5μU/mL。HOOK：20000μU/mL。
2.3荧光免疫层析平台
组合3：胰岛素抗体（货号：EKY0705A）标记荧光微球+胰岛素抗体（货号：EKY0705B）划膜；
线性范围：2μU/mL-300μU/mL；最低检出限：2μU/mL。HOOK：20000μU/mL。
2.4各组分稳定性评估
2.4.1采用胰岛素磁珠标记物稀释液（货号：DCD0567A）将磁珠包被的胰岛素抗体浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；
2.4.2采用胰岛素吖啶酯标记物稀释液（货号：DCD0567A）将吖啶酯标记的胰岛素抗体浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；
2.4.3采用胰岛素 AP酶标记物稀释液（货号：DCD0535A）将碱性磷酸酶标记的胰岛素抗体浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；
2.4.4采用胰岛素抗原稀释液（货号：DCD0566E）将胰岛素抗原配制成梯度进行37℃热稳定性实验；
如表1所示：
a.磁珠包被胰岛素抗体工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明磁珠包被胰岛素抗体工作液热稳定性良好；
b.吖啶酯标记胰岛素抗体工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明吖啶酯标记胰岛素抗体工作液热稳定性良好；
c.碱性磷酸酶标记胰岛素抗体工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明碱性磷酸酶标记胰岛素抗体工作液热稳定性良好；
d.胰岛素抗原梯度（液体型）单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±15%以内，表明胰岛素抗原（液体型）梯度热稳定性良好。
表1 胰岛素抗原各组分工作液及标准品热稳定性7天数据
序号 | 胰岛素抗原稀释浓度（μU/mL） | 磁珠-包被胰岛素抗体工作液37℃热加速7天变化 | 吖啶酯-标记胰岛素工作液37℃热加速7天变化 | AP酶-标记胰岛素工作液37℃热加速7天变化 | 胰岛素抗原梯度（液体型）37℃热加速7天变化 |
S0 | 0 | -3.7% | -4.2% | -1.8% | -3.2% |
S1 | 0.5 | -3.3% | -11.3% | -1.4% | -8.9% |
S2 | 2 | -4.1% | -9.1% | 2.9% | -14.5% |
S3 | 10 | 7.1% | -7.7% | 6.2% | -12.4% |
S4 | 50 | 7.7% | -4.6% | 6.4% | -12.2% |
S5 | 100 | 2.5% | -12.5% | 2.9% | -10.0% |
S6 | 500 | 1.9% | -9.1% | 4.1% | -7.5% |
平均变化（不含S0） | 2.0% | -9.0% | 4.5% | -10.9% | |
3.临床相关性
3.1化学发光（AE）平台：
西宝生物发光（AE）平台皮胰岛素原料配对组合1与罗氏的胰岛素试剂（电化学发光法）赋值的临床样本相关性R2＞0.95，相关性良好；
3.2化学发光（AP）平台：
西宝生物发光（AP）平台皮胰岛素原料配对组合2与罗氏的胰岛素试剂（电化学发光法）赋值的临床样本相关性R2＞0.95，相关性良好；
3.3荧光免疫层析平台：
西宝生物荧光免疫层析平台胰岛素原料配对组合5与罗氏的胰岛素试剂（电化学发光法）赋值的临床样本相关性R2＞0.95左右，相关性良好。
4. 测试方案
4.1化学发光（AE）平台
胰岛素抗体配对组合1
待测抗原:胰岛素抗原（货号：EJL0684B）；
样本:样品加样量20ul；
试剂1：胰岛素抗体2（货号：EKY0705B）包被-磁珠稀释物，用量50ul/测试；
试剂2：胰岛素抗体1（货号：EKY0705A）标记-吖啶酯稀释物，用量50ul/测试；
反应条件：
第一步：20ul样本+50ul试剂1+50ul 试剂2，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入预激发液及激发液，进行测试。
测试使用发光仪器:科斯迈SMART 500S。
4.2化学发光（AP）平台
胰岛素抗体配对组合2
待测抗原:胰岛素抗原（货号：EJL0684B）；
样本:样品加样量20ul；
试剂1：胰岛素抗体（货号：EKY0705B）包被-磁珠稀释物，用量50ul/测试；
试剂2：胰岛素抗体（货号：EKY0705A）标记-碱性磷酸酶稀释物，用量50ul/测试；
反应条件：
第一步：20ul样本+50ul试剂1+50ul试剂2，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入底物，进行测试。
测试使用发光仪器:迎凯Shine i2900。
4.3荧光免疫层析平台
胰岛素抗体配对组合3
待测抗原:胰岛素抗原（货号：EJL0684B）；
反应条件：10ul样品+100ul稀释液混匀，上样，反应时间（10min-15min）；
测试使用荧光仪器:和迈FIC-S100。
5.产品信息
产品名称 | 货号 | 推荐配对 |
胰岛素抗体 | EKY0705A | 胰岛素配对： 胰岛素抗体（货号：EKY0705B）包被羧基磁珠+胰岛素抗体（货号：EKY0705A）标记吖啶酯；（发光配对组合1） 胰岛素抗体（货号：EKY0705B）包被羧基磁珠+胰岛素抗体（货号：EKY0705A）标记碱性磷酸酶；（发光配对组合2） 胰岛素抗体（货号：EKY0705A）标记荧光微球+胰岛素抗体（货号：EKY0705B）划膜； （荧光配对组合3） |
胰岛素抗体 | EKY0705B | |
胰岛素抗原 | EJL0684B | |
胰岛素抗体（货号：EKY0705B）包被羧基磁珠浓缩液 | DKY1389A | |
胰岛素抗体（货号：EKY0705A）标记吖啶酯浓缩液 | DKY1389B | |
胰岛素抗体（货号：EKY0705A）标记碱性磷酸酶浓缩液 | DKY1389C | |
胰岛素抗体（货号：EKY0705A）标记荧光微球浓缩液 | DKY1389D | |
AMPPD 发光底物液（即用型） | DCD0517B | |
APS-5 发光底物液（即用型） | ECD0532M | |
羧基磁性微球，1um | DEG0852A | |
重组碱性磷酸酶（高活性） | DCE0108L | |
链霉亲和素磁性微球，1.5um | DEG0814A-10ml | |
时间分辨荧光微球，羧基（300nm） | AEG0789C | |
胰岛素抗体磁珠标记物稀释液 | DCD0567A | |
胰岛素抗体抗原稀释液 | DCD0566E | |
胰岛素抗体吖啶酯标记物稀释液 | DCD0567A | |
胰岛素抗体AP标记物稀释液 | DCD0535A |