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ISOGEN II RNA抽提试剂

发布时间:2026-01-09 点击数:6
ISOGEN II RNA抽提试剂
ISOGEN II
从动物组织和培养细胞中高效分离纯化含有小 RNA 的总 RNA
◆原理
ISOGEN II 是从动物组织和培养细胞中总 RNA 和小 RNA 的抽提试剂。本品是含有苯酚和胍的均相液体,根据与细胞成分的相互作用,能单一地分离 RNA 。
使用旧产品(ISOGEN 和 ISOGEN-LS)需要添加氯仿,要进行液相分离,而本产品则无需此步骤。在样品中加入 ISOGEN II 溶解或是均质化之后,再添加水,因为 DNA、蛋白质、多糖类等会形成不溶性沉淀,进行离心分离后可以去除。用乙醇沉淀并洗涤、溶解得到上清之后,能分离出高纯度的 RNA 。
◆优点?特色
● 不需使用氯仿分离 RNA
● 比起旧产品( ISOGEN 等),小RNA 的抽提效率更高
● 可以把大 RNA(>200 bases)和小 RNA(<200 bases)分离(同时提供不分离的方案)
● DNA 污染少,抽提的 RNA 可以直接用于 RT-PCR 和 RT-qPCR 上
● 约 1 h 可完成 RNA 的抽提
内容和保存条件
产品名称
构成
ISOGEN II
ISOGEN II
100 mL
使用手册
1本
冷藏保存
请在购买日起6个月内使用
本品可在室温下运输。产品到达后,在2~10℃条件下保存即可正常使用
产品安全数据图表(MSDS)
ISOGEN II MSDS
使用手册
ISOGEN II 手册
◆案例?应用
操作流程
0815547047925228.jpg
◆使用例子
Data 1 抽提得到的 RNA 电泳
根据 ISOGEN 和 ISOGEN II 的方案抽提 RNA,进行电泳
blob.png
M:RNA Ladder (Code No.311-06261)
           Lane1:ISOGEN 抽提总 RNA(2 μg)
           Lane2:ISOGEN II 抽提总 RNA(2 μg)
           Lane3:ISOGEN II 抽提高分子 RNA(2 μg)
           Lane4:ISOGEN II 抽提 小RNA(0.2 μg)
           1.2% Agarose S(甲醛变性)EtBr 染色
2414509464752522.jpg
Lane1:ISOGEN 抽提总 RNA(5 μg)
           Lane2:ISOGEN II 抽提总 RNA(5 μg)
           Lane3:ISOGEN II 抽提高分子 RNA(5 μg)
           Lane4:ISOGEN II 抽提小 RNA(0.5 μg)
           12% 聚丙烯酰胺(Urea 变性)EtBr 染色
ISOGEN II 能抽提和 ISOGEN 同等的总 RNA
ISOGEN II 能对 200 base 以上的高分子 RNA 和 10~200 base 的小 RNA 进行分离
Data 2 ISOGEN 和 ISOGEN II 抽提的总 RNA 用3D-GeneHuman miRNA Oligo chip(东来株式会社)分析。
2.jpg
ISOGEN II 比 ISOGEN 能更完整地抽提 miRNA
Data 3 RT-PCR
用 ISOGEN 和 ISOGEN II 从 HeLa 细胞中提取出 RNA 并定性,再用 PT-PCR 检测出 β-Actin 基因。同时进行没有经过 RT 反应的对照实验。
blob.png
tu.jpg
1:模板RNA量 500 ng
2:模板RNA量 100 ng
3:模板RNA量 20 mg
M:Gene Ladder 100
实验证明以ISOGEN II抽提的RNA与以ISOGEN抽提的RNA相比,DNA残留更少。
Data 4 RNA 提取量的参考值
分别用 大 RNA 的提取总 RNA 的提取方案得到的 RNA 的提取量的参考值如下:
试剂
大 RNA 的提取
总 RNA 的提取
组织
肝脏
5~7 g RNA/mg tissue
6~8 μg RNA/mg tissue
肾脏、脾脏
3~4 g RNA/mg tissue
3~4 μg RNA/mg tissue
骨骼肌、脑、肺
0.5~1.5 g RNA/mg tissue
0.5~1.5 μg RNA/mg tissue
胎盘
1~3 g RNA/mg tissue
1~3 μg RNA/mg tissue
培养细胞
上皮细胞
5~8 g RNA/108 cells
5~10 μg RNA/106 cells
成纤维细胞
3~5 g RNA/108 cells
4~6 μg RNA/106 cells
◆注意事项
● 本品是实验研究用的试剂,不能作为医药品或其他目的使用。另外,如果您对试剂的基本的知识不了解。请不要使用。
● 因为 ISOGEN II 是医药用外有害物质(苯酚制剂),所以请小心操作。
● 使用时请穿着适当的防护设备(手套、眼镜等)。
● 请不要吸入蒸汽,进行充分的通风。
● 如果接触皮肤或眼睛,请用大量的水冲洗至少15分钟,并前往医院就诊。
● 本品的操作请按照手册记载的内容进行
● 对于和手册记载内容不同的操作带来的事故,日本基因不负任何责任。
产品列表
产品编号产品名称产品规格产品等级
311-07361ISOGEN Ⅱ
           总RNA及小RNA提取试剂
100 mL医药用外有害物质
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