CTGF ELISA 试剂盒
发布时间:2025-02-11 点击数:10
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结缔组织生长因子CTGF(Connective Tissue Growth Factor)是一种由脐静脉和血管内皮细胞产生的约38 kDa的分泌蛋白。除了参与细胞粘附和软骨细胞的增殖和分化以外,它也被认为是组织纤维化的一个主要因素,还可作为纤维化疾病的候选标志物。
FUJIFILM Wako可提供用于检测CTGF全长的ELISA试剂盒以及检测全长+N末端的ELISA试剂盒,通过组合使用这两种ELISA试剂盒,能够准确检测作为特发性肺纤维化(IPF)候选生物标志物的血液N末端CTGF片段。
◆什么是CTGF?
CTGF( Connective Tissue Growth Factor)是一种由脐静脉和血管内皮细胞产生的约38kDa的分泌蛋白。它是CCN (Cyr61/CTGF /Nov)家族的一种,亦称为CCN2。CTGF主要由Module 1 - Module 4的四个部分组成,Module 1称为IGF结合结构域,Module 2称为VWC结构域,Module 3称为TSP-1结构域,Module 4称为CT结构域。各结构域通过与不同的因子结合来发挥作用。
![1216655398062286.jpg 03023_img01 拷贝.jpg](http://labchem.fujifilm-wako.com.cn/upfiles/images/202210/1216655398062286.jpg)
CTGF在组织纤维化中发挥重要作用,因此可作为纤维化的候选生物标志物。CTGF由TGF-β诱导表达,通过促进产生细胞外基质的肌成纤维细胞的分化和胶原蛋白的合成,从而参与纤维化1)。在小鼠皮肤纤维化中,TGF-β和CTGF已被证明分别在纤维化的发生和持续中起重要作用2)。此外,还有报告称CTGF与软骨细胞的增殖和分化,细胞间的粘连有关。
CTGF除了全长CTGF之外,还有Module 2 - Module 3间被切断产生的N末端(Module 1-2)CTGF和C末端(Module 3-4)CTGF。由于CTGF(C末端)容易被分解,所以血液中主要以CTGF (全长)和CTGF (N末端)的形式存在。CTGF (N末端)作为特发性肺纤维化(IPF: Idiopathic Pulmonary Fibrosis)的生物标志物备受期待3),但由于CTGF(全长)和CTGF(N末端)同时存在,所以单独检测CTGF(N末端)非常困难。
◆试剂盒组成
96次用 | |
抗体固相化孔板 | 1 plate |
CTGF标准品 | 1支 |
缓冲液 | 20 mL |
生物素结合抗体溶液 | 100 μL |
过氧化物酶结合链霉亲和素溶液 | 100 μL |
TMB溶液 | 12 mL |
反应终止液 | 12 mL |
清洗液(10×) | 100 mL |
标准品样品制备溶液 | 100 mL |
孔板封条 | 4片 |
◆CTGF ELISA试剂盒 Wako
FUJIFILM Wako可分别提供检测CTGF全长以及全长+N末端的ELISA试剂盒。通过组合使用两种ELISA试剂盒,可准确检测特发性肺纤维化(IPF)的生物标志物--血液中的N末端CTGF4)。
![1216655399451392.jpg 03023_img02 拷贝.jpg](http://labchem.fujifilm-wako.com.cn/upfiles/images/202210/1216655399451392.jpg)
产品系列
产品名称 | CTGF(全长)ELISA试剂盒 Wako | CTGF(全长+N末端)ELISA试剂盒 Wako |
产品编号 | 290-84701 | 292-84901 |
检测对象 | CTGF(全长) | CTGF(全长+N末端) |
检测原理 | ![]() | ![]() |
样品 | 人血清,人血浆(EDTA) | |
标准曲线范围 | 7.81-500 pM | |
所需样品量 | 人血清:5 μL,人血浆(EDTA):10 μL | |
检测时间 | 2 h 50 min | |
检测法 | 显色法 |
◆性能数据
■ 全长,N末端片段,C末端片段的交叉性
分别使用各ELISA试剂盒与全长,N末端片段,C末端片段反应,确认其交叉性。
![1216655405592533.jpg 03023_img09 拷贝.jpg](http://labchem.fujifilm-wako.com.cn/upfiles/images/202210/1216655405592533.jpg)
【结果】
CTGF(全长)ELISA试剂盒 Wako可以特异性检测CTGF全长,CTGF(全长+N末端)ELISA试剂盒 Wako可以特异性检测CTGF全长和N末端片段。
■ 与CCN家族的交叉性
确认了包含CTGF在内的与CCN家族的交叉率(500 pM,n=8)。
CTGF ELISA(全长) 交叉率 (%) | CTGF ELISA(全长+N末端区域) 交叉率 (%) | |
CCN1 | <0.5 | N.D. |
CCN2(CTGF) | 100 | 100 |
CCN3 | <0.5 | N.D. |
CCN4 | <0.5 | N.D. |
CCN5 | <0.5 | N.D. |
CCN6 | <0.5 | N.D. |
N.D. = 未检出
【结果】
FUJIFIM Wako的试剂盒在CCN家族中,对CCN2(CTGF)显示高特异性。
■ 加标回收测试
CTGF(全长+N末端) ELISA试剂盒 Wako
样品ID | 添加量 (pM) | 检测值 (pM) | 回收量 (pM) | 回收率 (%) |
人血清 样品No.15 | 0 | 61.5 | ― | ― |
10 | 71.4 | 9.9 | 99 | |
50 | 110 | 48.5 | 97 | |
100 | 163 | 102 | 102 | |
150 | 215 | 154 | 103 | |
300 | 370 | 309 | 103 | |
平均 | 101 | |||
人血浆(EDTA) 样品No.15 | 0 | 71.5 | ― | ― |
10 | 80.8 | 9.3 | 93 | |
50 | 121 | 49.5 | 99 | |
100 | 174 | 103 | 103 | |
150 | 227 | 156 | 104 | |
300 | 380 | 309 | 103 | |
平均 | 100 |
CTGF(全长) ELISA试剂盒 Wako
样品 | 添加量 (pM) | 检测值 (pM) | 回收量 (pM) | 回收率 (%) |
人血清 样品No.16 | 0 | 37.8 | ― | ― |
10 | 47 | 9.2 | 92 | |
50 | 87.4 | 49.6 | 99.2 | |
100 | 141 | 103 | 103 | |
150 | 191 | 153 | 102 | |
300 | 343 | 305 | 102 | |
平均 | 99.6 | |||
人血浆 (EDTA) 样品No.16 | 0 | 16.9 | ― | ― |
10 | 26.2 | 9.3 | 93 | |
50 | 65.6 | 48.7 | 97.4 | |
100 | 122 | 105 | 105 | |
150 | 173 | 156 | 104 | |
300 | 326 | 309 | 103 | |
平均 | 100 |
■ 稀释线性测试
CTGF(全长+N末端) ELISA试剂盒 Wako
人血清 | 人血浆 |
![]() | ![]() |
CTGF(全长) ELISA试剂盒 Wako
人血清 | 人血浆 |
![]() | ![]() |
◆应用数据
■ N末端CTGF的检测(稀释线性测试)
使用梯度稀释的人血清或人血浆(EDTA),用CTGF(全长+N末端)ELISA试剂盒 Wako检测CTGF全长+N末端, 用CTGF(全长)ELISA试剂盒 Wako检测CTGF全长。求差值计算CTGF(N末端)量,确认稀释线性。
![]() | ![]() |
样品 | 稀释倍率 | CTGF(全长+N末端)(pM) | CTGF(全长)(pM) | CTGF(N末端)(pM) |
人 血清 | 1/1 | 1735 | 952 | 783 |
1/2 | 875 | 495 | 380 | |
1/4 | 417 | 237 | 180 | |
人 血浆(EDTA) | 1/1 | 684 | 126 | 558 |
1/2 | 347 | 66.2 | 281 | |
1/4 | 157 | 34.9 * 参考值 | 122 |
【结果】
使用该方法检测定量CTGF(N末端),可观察到高稀释线性。
■ 健康者和IPF患者血浆中N末端CTGF的检测
使用CTGF(全长+N末端)ELISA试剂盒 Wako和CTGF(全长)ELISA试剂盒 Wako,检测从健康者以及特发性肺纤维化(IPF)患者中提取的血浆(EDTA),并求出N末端CTGF的量。
![2416665852524343.jpg 2416665852524343.jpg](http://labchem.fujifilm-wako.com.cn/upfiles/images/202210/2416665852524343.jpg)
健康者 | |||
ID | CTGF(全长+N末端)(pM) | CTGF(全长)(pM) | CTGF(N末端)(pM) |
1 | 494 | 83.4 | 411 |
2 | 535 | 116 | 419 |
3 | 580 | 155 | 425 |
4 | 661 | 129 | 532 |
5 | 383 | 63.5 | 319 |
mean | 421 | ||
SD | 75.6 |
IPF患者 | |||
ID | CTGF(全长+N末端)(pM) | CTGF(全长)(pM) | CTGF(N末端)(pM) |
1 | 1226 | 213 | 1013 |
2 | 1004 | 187 | 817 |
3 | 432 | 35.4 | 397 |
4 | 1422 | 278 | 1144 |
5 | 938 | 39.9 | 898 |
6 | 682 | 73.2 | 609 |
7 | 1123 | 168 | 955 |
8 | 849 | 45.5 | 804 |
9 | 857 | 60.6 | 796 |
mean | 826 | ||
SD | 221 |
【结果】
IPF患者血浆中N末端的CTGF量明显高于健康者。
产品列表
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
290-84701 | CTGF(Full) ELISA Kit Wako CTGF (全长) ELISA试剂盒 Wako | 96次用 | 免疫化学用 |
292-84901 | CTGF(Full+N-terminal region) ELISA Kit Wako CTGF(全长+N末端) ELISA试剂盒 Wako | 96次用 | 免疫化学用 |