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高分子β-淀粉样蛋白寡聚体ELISA试剂盒Wako Ver.2

发布时间：2024-10-16 点击数：46
高分子β-淀粉样蛋白寡聚体ELISA试剂盒Wako Ver.2
High Molecular Amyloid β Oligomer ELISA Kit Wako Ver.2
免疫化学用 for Immunochemistry
制造商：FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation
保存条件：冷藏（冰冻运输）
◆试剂盒内容
96次用
抗体固相化孔板--1个
标准溶液（10 nM）--100 μL
缓冲液--60 mL
生物素偶联抗体（BAN50）溶液--100 μL
过氧化物酶偶联链霉亲和素溶液--100 μL
显色剂1--6 mL
显色剂2--6 mL
洗涤液（10×）--100 mL
标准品制备溶液--12 mL
血浆血清用样品制备溶液--50 mL
封板贴--4张
◆特点
●　可检测血浆、血清、脑脊液样品
●　可特异性地对9-mer以上的高分子Aβ寡聚体进行定量
◆试剂盒功能
标准曲线范围※1
0.41~100 pM（人脑脊液）
0.16~40 pM（人血清及EDTA抗凝血浆）
反应Aβ寡聚体
≧9mer的Aβ寡聚体
检测对象样品
血清、EDTA抗凝血浆、脑脊液、in vitro Aβ寡聚体
所需样品量
人脑脊液：25 μL（4倍稀释）
人血清、血浆（EDTA）：50 μL（2倍稀释）
检测时间
4.5 ｈ
检测方法※2
发光法
※1 基于16-mer多抗原肽（MAP）标准品的换算值。
※2 检测时需要准备酶标仪。
201582178324.png
◆检测原理
本系列采取双抗体夹心法ELISA，使用抗Aβ抗体（BAN50）作为捕获抗体和检测抗体，与1~8-mer几乎不发生反应，与9-mer以上的Aβ寡聚体则发生特异性反应。使用带有16个抗Aβ抗体（BAN50的抗体识别序列的16-mer MAP肽作为标准品。
0817230865185236.jpg201582180590.jpg
◆高分子Aβ寡聚体的特异性数据
将Aβ1-42肽冷藏并孵育过夜后，通过超滤分离为不足30 kDa（8聚体以下）和30 kDa以上（9聚体以上），并使用Aβ抗体（BAN50）对各组进行Western Blot和ELISA（本方法）检测。
201582180608.jpg
2615299998951358.jpg2615299964383435.jpg
8聚体以下（＜30 kDa）的Fraction B几乎检测不到信号；9聚体以上（≥30 kDa）的Fraction A则检测到强烈的信号。
◆检测案例
检测案例1：加标回收和稀释度线性测试
人血浆样品
未添加
+0.5 pM标准溶液
+1 pM标准溶液
+5 pM标准溶液
+30 pM标准溶液
检测值
检测值
Recovery
检测值
Recovery
检测值
Recovery
检测值
Recovery
1.85 pM
2.36 pM
102%
2.85 pM
100%
7.11 pM
105%
31.2 pM
97.80%
人血清样品
未添加
+0.5 pM标准溶液
+1 pM标准溶液
+5 pM标准溶液
+30 pM标准溶液
检测值
检测值
Recovery
检测值
Recovery
检测值
Recovery
检测值
Recovery
1.58 pM
2.07 pM
98%
2.59 pM
101%
6.64 pM
101%
31.9 pM
101%
人脑脊液①
未添加
+3 pM标准溶液
+6 pM标准溶液
+15 pM标准溶液
检测值
检测值
Recovery
检测值
Recovery
检测值
Recovery
5.16 pM
8.01 pM
95%
10.6 pM
91%
18.1 pM
86%
人脑脊液②
未添加
+10 pM标准溶液
+15 pM标准溶液
+35 pM标准溶液
检测值
检测值
Recovery
检测值
Recovery
检测值
Recovery
29.1 pM
38.8 pM
97%
44.0 pM
99.30%
59.9 pM
88%
201582180961.jpg
检测案例2：检测临床样品（脑脊液）
用本ELISA法检测非认知症患者（Control）、轻度认知障碍患者（MCI）阿尔茨海默病（AD）患者的脑脊液。
 
年龄
性别
MMSE※3
脑脊液Aβ寡聚体（pM）
Control
           n=5
69
M
30
2.37
60
F
30
1.65
59
M
30
2.82
46
M
28
2.24
60
F
29
1.34
MCI
           n=5
69
F
24
3.6
76
M
23
2.62
82
M
26
2.33
69
F
23
2.67
73
F
25
2.34
AD
           n=8
79
F
10
3.56
88
M
24
3.13
62
M
16
4.13
78
M
13
3.95
63
M
14
3.88
74
F
16
3.25
76
M
19
3.69
84
M
16
4.34
※3：MMSE score：认知功能诊断问诊检查的分数
※3：MMSE score：30-28分：正常
※3：MMSE score：27-24分：怀疑有轻度认知障碍
※3：MMSE score：23分以下：怀疑严重认知症
201582181503.png201582181535.png
非认知症患者（Control）、轻度认知障碍患者（MCI）阿尔茨海默病患者（AD）间的检测值差异明显。
结果表明，高分子Aβ寡聚体的检测值与MMSE Score相关。
◆对比表
产品名称
High Molecular Amyloid β Oligomer ELISA Kit Wako Ver.2
High Molecular Amyloid β Oligomer ELISA Kit Wako
产品编号
290-82001
298-80101
标准曲线范围※1
0.41～100 pM（人脑脊液）
           0.16～40 pM（人血清及EDTA抗凝血浆）
0.410~100 pM（人脑脊液）
反应Aβ寡聚体
≧9 mer的Aβ寡聚体
≧9 mer的Aβ寡聚体
检测对象样本
人血清、EDTA抗凝血浆、
脑脊液in vitro Aβ寡聚体
人脑脊液
in vitro Aβ寡聚体
必要样本体积
人脑脊液：25 μL（4倍稀释）
           人血清及EDTA抗凝血浆：50 μL（2倍稀释）
人脑脊液：25 μL（4倍稀释）
检测时间
4.5 h
4.5 h
检测方法※2
发光法
发光法
※1 基于16-mer多抗原肽（MAP）标准品的换算值。
※2 检测时需要准备酶标仪。
产品列表
产品编号产品名称产品规格
290-82001High Molecular Amyloid β Oligomer ELISA Kit Wako Ver.2
           高分子β-淀粉样蛋白寡聚体ELISA试剂盒Wako Ver.2		96 次用
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