细胞葡萄糖摄取检测试剂盒 Glucose Cellular Uptake Measurement Kit

细胞内葡萄糖吸收检测试剂盒

Glucose Cellular Uptake Measurement Kit

◆原理

胰岛素是降血糖的激素，它能够以脂肪细胞或者骨骼肌等为中心促进糖输送活性，将糖从细胞外吸收到细胞内。

测定糖的吸收量一般是使用3H标记的3-O-甲基-D-葡萄糖和2-脱氧葡萄糖（2DG）的方法。这种方法需要用同位素，所以只能在RI管理区域内使用，在一般的实验室也无法使用。

本试剂盒使用安全，操作简单，用non-RI法能够简便地测定细胞内糖吸收量。

试剂盒测定

细胞吸收的2DG会在己糖激酶的催化下会被2-脱氧葡萄糖-6磷酸（DG6P）氧化，不继续进行酶反应而是留在细胞内。

本试剂盒是在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PDH）的酶反应下，生成2DG6P成比例地生成NADPH，然后NADPH发生氧化生成荧光基质后就可以测定荧光物质的荧光强度。

◆优点•特色

●　检测2-deoxyglucose (2DG) (葡萄糖类似物) 摄入的总量

●　葡萄糖，2DG被细胞摄取后，在己糖激酶作用下，迅速磷酸化为2-脱氧葡萄糖-6-磷酸（2DG6P）。

●　而2DG6P在细胞内聚集，不会发生进行代谢。

●　细胞裂解物中的2DG6P在耦合酶作用下，产生荧光信号，其强度与2DG6P的量正相关。

●　利用已知2DG6P的标准曲线，对照检测的荧光强度计算样品2DG水平

相关产品比较

	【本试剂盒】 Measurement Kit, Broad Range, Fluorometric Cat. No. MBR-PMG-K01E	【相关产品】 2-Deoxyglucose (2DG) Uptake Measurement Kit Cat. No. CSR-OKP-PMG-K01E
测定方法	Non-RI法	Non-RI法
操作时间	3小时	5~7小时（2天）
检测方法	荧光（Ex 540 nm/Em 590 nm）	发光（420 nm）
特征	测定范围广（0~50 μm）能够迅速进行测定可以使用高通量法一步测定	高灵敏度（0~5 μm）定量检测试剂盒

◆案例•应用

试剂盒组成

试剂	规格	数量	储存（开封后）
2DG6P Solution (1 mM)	500 μL	3×3 mL	-20°C (避光)
Sample Diluent Buffer Concentrate (100x)	5 mL	1 vial
Substrate Buffer	9 mL	1 vial
Fluorescent Substrate	120 μL	1 vial
Enzyme Solution	270 μL	1 vial

该试剂盒可进行100次反应

需要准备：

●　超纯水（蒸馏水）

●　2-deoxyglucose 建议产品

●　牛血清白蛋白建议产品

●　96-well黑色多孔板

●　96-well荧光酶标仪（激发波长540 nm/荧光波长590 nm）

●　超声波细胞裂解装置

胰岛素刺激3T3-L1细胞分化后2DG的摄取情况

※具体操作见“相关资料”

◆产品列表

产品编号	产品名称	规格
CSR-MBR-PMG-K01E	Glucose Cellular Uptake Measurement Kit (Broad Range, Fluorometric) 细胞葡萄糖摄取检测试剂盒	100 tests

※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。